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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 0.75ML,1.5ML |
|---|---|---|---|
| 貨號 | TR002 |
轉染試劑Lipo3000
產品貨號：TR002
存儲條件：2-4℃保存1年。（避免冷凍）
產品說明
LABLEAD Lipo3000試劑采用了脂質納米顆粒(Lipid Nanoparticle)LNP遞送技術, 利用脂質形成納米微粒將核酸包裹起來形成核酸脂質納米粒，實現(xiàn)高轉染性和可重復性的實驗結果。其可針對廣泛類型的常見及難轉染細胞，實現(xiàn)超高轉染效率，同時提供更高的細胞活力。Lipo3000對大多數(shù)細胞毒性低并且性質溫和，并且我們優(yōu)化了轉染過程的全部四個步驟，并結合脂質體納米顆粒(LNP)遞送技術，實現(xiàn)了較高的轉染性能并可以降低所需的試劑量，同時盡可能降低對細胞系產生毒性的風險。對多種類型的細胞和培養(yǎng)板都具有高轉染效率；轉染時血清的存在不影響轉染效率的優(yōu)點。
適用范圍：貼壁細胞和懸浮細胞（哺乳動物細胞系）的轉染。
產品特點：
1) 卓yue的轉染效率—針對較難轉染細胞，可將效率提升2～10倍
2) 作用溫和，細胞毒性低—可改善細胞活力
3) 高性價比高，同時實現(xiàn)更好的轉染結果
使用方法
DNA的轉染
對大多數(shù)細胞來說，轉染時高的細胞密度可以得到高的轉染效率和表達水平，并能減少細胞毒性。
1.接種細胞至70-90%匯合度時轉染。
2.按照下表使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋Lipo3000-B試劑(建議同時用2管)，充分混勻
3.使用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋DNA，制備DNA預混液，然后添加Lipo3000-A 試劑，充分混勻。
4.在每管已稀釋的Lipo3000-B試劑中加入稀釋的DNA (1:1比例)。
5.室溫孵育5分鐘。
6.加入DNA-脂質體復合物至細胞中。
7.37℃孵育細胞2-4天。然后分析轉染細胞。
siRNA轉染
轉染siRNA至細胞中時，遵循如上所述的DNA實驗方案，但在稀釋siRNA時不要加入Lipo3000-A試劑(第3步)。
| 細胞培養(yǎng)容器 | 96-well | 24-well | 6-well | |
| 貼壁細胞 | 1～4×104 | 0.5～2×105 | 0.25～1×106 | |
| Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋Lipo3000-B試劑（建議同時用2管） | Opti-MEM培養(yǎng)基 | 5ul×2 | 25ul×2 | 125ul×2 |
| Lipo3000-B | 0.15和0.3ul | 0.75和1.5ul | 3.75和7.5ul | |
| Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋DNA，制備DNA預混液，然后添加Lipo3000-A試劑，充分混勻 | Opti-MEM培養(yǎng)基 | 10uL | 50ul | 250ul |
| DNA (0.5–5 ug/ul) | 0.2ug | 1ug | 5ug | |
| Lipo3000-A試劑(2 ul/ug DNA) | 0.4ul | 2ul | 10ul | |
| Lipo3000-B試劑中加入稀釋的DNA (1:1比例) | 稀釋的DNA | 5ul | 25ul | 125ul |
| 稀釋的Lipo3000-B | 5ul | 25ul | 125ul | |
| 室溫孵育5分鐘 | ||||
| 加入DNA-脂質體復合物至細胞中 | 96-well | 24-well | 6-well | |
| DNA-脂質體復合物 | 10uL | 50ul | 250ul | |
| 37°C孵育細胞2–4天。然后分析轉染細胞。 | ||||
特別提醒：
本公司所有產品僅供專業(yè)人員用于生命科學研究，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅。
常見細胞的轉染效率（僅供參考，實驗條件不同轉染效率會有較大差別)
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