疏水相互作用層析(HIC) 基于生物分子表面疏水基團(tuán)與填料疏水配體間的可逆結(jié)合:
高鹽上樣:在高鹽濃度(如硫酸銨)下,目標(biāo)分子(抗體、蛋白)疏水區(qū)域暴露,與填料的苯基配體結(jié)合;
梯度洗脫:逐步降低鹽濃度,減弱疏水作用力,實(shí)現(xiàn)目標(biāo)產(chǎn)物的選擇性解離;
溫和分離:保持生物分子天然構(gòu)象,避免變性風(fēng)險(xiǎn)。
特性 | 技術(shù)優(yōu)勢(shì) |
---|---|
基質(zhì)材料 | 高交聯(lián)瓊脂糖微球(如Sepharose® CL-6B類(lèi)似基質(zhì)),機(jī)械強(qiáng)度高,耐壓性好 |
配體類(lèi)型 | 苯基(Phenyl):疏水性適中,平衡載量與選擇性,適合多數(shù)抗體和蛋白 |
粒徑范圍 | 40–90 μm,優(yōu)化流體動(dòng)力學(xué)性能,兼顧高分辨率和流速 |
載量 | >45 mg IgG/mL 填料(實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)),適用于規(guī)模化生產(chǎn) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 耐受1 M NaOH原位清洗(CIP),壽命長(zhǎng),降低生產(chǎn)成本 |
批次一致性 | 符合GMP級(jí)別質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),確保工藝穩(wěn)定性 |
單克隆抗體(mAb)純化
用途:去除聚集體(HMW)、宿主蛋白(HCP)和DNA
方案:緊接Protein A層析后,優(yōu)化抗體純度(>99%)
重組蛋白精純
分離目標(biāo)蛋白與降解片段、疏水性雜質(zhì)
病毒/疫苗純化
溫和純化包膜病毒(如腺病毒、慢病毒),保持感染活性
核酸去除
結(jié)合高鹽條件有效吸附宿主DNA/RNA殘留
參數(shù) | BioToolomics Phenyl | 競(jìng)品A(苯基) | 優(yōu)勢(shì)體現(xiàn) |
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動(dòng)態(tài)載量(IgG) | 45 mg/mL | 30 mg/mL | +50% 載量提升 |
耐壓上限 | 0.5 MPa | 0.3 MPa | 適配中壓系統(tǒng) |
CIP耐受性 | >100 循環(huán) | ~50 循環(huán) | 降低填料更換成本 |
Q1:是否適合膜蛋白純化?
→ 是!苯基配體對(duì)膜蛋白疏水結(jié)構(gòu)域具有高親和力,但需添加溫和去垢劑(如DDM)。
Q2:如何避免目標(biāo)蛋白沉淀?
→ 優(yōu)化鹽類(lèi)型(推薦硫酸銨)、梯度斜率及洗脫緩沖液pH(近中性)。
Q3:能否替代辛基(Octyl)填料?
→ 苯基選擇性更溫和,適用于易變性蛋白;若需更強(qiáng)結(jié)合力(如脂質(zhì)結(jié)合蛋白),選辛基。
規(guī)格:
25 mL、100 mL、500 mL預(yù)裝柱|1 L、5 L散裝填料
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總結(jié):
BioToolomics Phenyl 疏水層析填料以 高載量、強(qiáng)耐堿性和出色批次一致性,成為抗體與病毒純化工藝的核心工具,顯著降低生產(chǎn)成本并符合GMP要求。其優(yōu)化的苯基配體設(shè)計(jì),在保證選擇性的同時(shí)提升回收率,是生物制藥企業(yè)國(guó)產(chǎn)化替代的理想選擇。
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