最新產(chǎn)品
暫無(wú)信息 |
液相色譜儀色譜柱3大安裝步驟和使用秘訣大揭密
液相色譜儀由高壓液體泵、檢測(cè)器及液相色譜柱等三部分組成,其中液相色譜柱的正確安裝和使用,是液相色譜工作的關(guān)鍵;也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的必經(jīng)之路。因此,液相色譜柱的安裝和使用都有哪些應(yīng)該注意和理解的呢?
色譜柱的構(gòu)造分別為:柱管、壓帽/卡套、篩板(濾片)、接頭
首先,液相色譜儀中的液相色譜柱的三大安裝步驟:
液相色譜儀中的液相色譜柱安裝*步:
.拆開柱包裝盒,確認(rèn)色譜柱的類型、尺寸、出廠日期以及柱內(nèi)貯存的溶劑。
液相色譜儀中的液相色譜柱安裝第二步:
擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用。
液相色譜儀中的液相色譜柱安裝第三步:
按柱管上標(biāo)示的流動(dòng)相流向,將色譜柱的入口端通過(guò)連接管與進(jìn)樣閥出口相連接(如條件允許,建議在柱前使用保護(hù)柱);柱的出口與檢測(cè)器連接。連接 管是外徑為1.57mm、內(nèi)徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。連接管的兩端均有空心螺釘及密封用壓環(huán)。在接管時(shí)一定要設(shè)法降低柱外死體積。
液相色譜柱的使用應(yīng)該注意的三點(diǎn):
在色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。
樣品的前處理:
使用流動(dòng)相溶解樣品,使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì),使用0.45μm的過(guò)濾膜過(guò)濾除去微粒雜質(zhì)。
流動(dòng)相流速的選擇:
因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效。對(duì)于一根特定的色譜柱,要追求*柱效,使用* 流速。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱,流速一般選擇1ml/min,對(duì)于內(nèi)徑為4.0mm柱,流速0.8ml/min為佳。當(dāng)選用*流速時(shí),分析時(shí)間可能 延長(zhǎng)??刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí),可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量)。
流動(dòng)相的配制:
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動(dòng)相具備的特點(diǎn)是,流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長(zhǎng)時(shí)間保留在柱中);流動(dòng)相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外);流動(dòng)相的黏度要盡量小,以便在使用 較長(zhǎng)的分析柱時(shí)能得到好的分離效果;同時(shí)降低柱壓降,延長(zhǎng)液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度);