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貨物所在地:上海上海市
所在地: 上海
更新時間:2025-04-17 21:00:08
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羥自由基清除能力測定試劑盒
微量法
規(guī)格:100管/96樣
注意:正式測定前務(wù)必取2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體3mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體3mL×1瓶,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。
H2O2/ Fe2+通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+ ,導(dǎo)致536nm吸光度下降,樣品對536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。
需自備的儀器和用品:
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
操作步驟:
一、樣品的制備:
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2. 血清、果汁等液體樣品可直接測定。
3. 提取物(或者藥物)可配制成一定濃度,如5mg/mL。
二、操作步驟
1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至536nm,蒸餾水調(diào)零。
2、操作表
空白管 | 對照管 | 測定管 | |
試劑一(μL) | 30 | 30 | 30 |
試劑二(μL) | 80 | 80 | 80 |
試劑三(μL) | 20 | 20 | 20 |
立即混勻,防止局部顏色過濃 | |||
樣品(μL) | 50 | ||
試劑四(μL) | 20 | 20 | |
H2O(μL) | 70 | 50 | |
混勻37℃,60min,于微量石英比色皿/96孔板中測定536nm處吸光值,空白管、對照管和測定管的吸光值分別記為A空、A對和A測。 |
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
計算公式:
羥自由基清除率 D% =(A測-A對)÷(A空-A對)×100%
A空、A對、A測:空白管、對照管和測定管的吸光值。
注意事項:
為了比較不同樣品羥自由基清除能力,對于同一批樣品必須加入等量的樣品,血清、組織勻漿、果汁等液體樣品加入同樣體積,提取物(或者藥物)配制成同樣濃度。
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)