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貨物所在地:上海上海市
所在地: 上海
更新時(shí)間:2025-04-17 21:00:08
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DAB 染色試劑盒
簡(jiǎn)介
二氨基聯(lián)苯胺(DAB)是辣根過氧化物酶最敏感、最常-用的顯色底物,反應(yīng)產(chǎn)物為不溶
于水、二甲苯和醇的棕色沉淀物。本產(chǎn)品采用特殊配方,靈敏度高,背景低,儲(chǔ)存穩(wěn)定,使用方便。適合于蛋白印跡、免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)、斑點(diǎn)印跡和生物芯片等的染色和顯色反應(yīng)。
包裝規(guī)格:
組分 | 規(guī)格 1 | 規(guī)格 2 |
DAB 顯色液 A(20×) | 0.5mL | 1mL |
DAB 顯色液 B(20×) | 0.5mL | 1mL |
用法:
1. 臨用前配制 10 mL 1×DAB 顯色工作液:將 0.5 mL 20× DAB 顯色液 A 加入 9 mL 1
×PBS 中并渦旋混勻。向 DAB / PBS 混合物中加入 0.5 mL 20×DAB 顯色液 B 渦旋混合均勻。 可以根據(jù)需要按比例縮放體積。 注意:不要使用含有疊氮-化鈉的緩沖液,疊氮-化鈉是一種 HRP 抑制劑。
2. 在樣品的最后一次洗滌完畢后,去除洗滌液,加入足夠 的 DAB 顯色工作液,確保能充分覆蓋樣品。室溫避光孵育 3-30 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間,直至顯色達(dá)到預(yù)期深淺。免疫印跡實(shí)驗(yàn), 應(yīng)保證樣品在一個(gè)足夠多的染色液中且能被自由晃動(dòng)。
3. 去除 DAB 染色工作液,用 PBS 沖洗樣品幾次以中止顯色反應(yīng)。對(duì)于用顯微鏡觀察的細(xì)胞或組織樣品,可復(fù)染樣品(可選)并安裝在水性封固介質(zhì)中?;蛘?,可以將樣品脫水并安裝在有機(jī)封固劑中。免疫印跡實(shí)驗(yàn),可將樣品用水沖洗,風(fēng)干,然后在室溫下儲(chǔ)存。
DAB 染色試劑盒儲(chǔ)存與運(yùn)輸:
-20℃避光密閉保存,一年有效。避免反復(fù)凍融。2~8℃運(yùn)輸,在途時(shí)間 5 天對(duì)試劑無(wú)影響。
注意事項(xiàng)
1. DAB 對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
2. 顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,新鮮配制的工作液應(yīng)為無(wú)色或淺棕色,如顏色過深,請(qǐng)勿使用。
3. 顯色時(shí)間嚴(yán)格控制,根據(jù)情況調(diào)整,以免顯色過度。固相膜顯色數(shù)小時(shí)后即會(huì)褪色,不能永-久存在。
4. 請(qǐng)將沾有DAB 顯色液A 的容器等放在含有 3% KMnO4,2% NaHCO3 的溶液浸泡 3h, 以減少污染。
5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品, 不得存放于普通住宅內(nèi)。
6. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見問題與分析
1. 背景顯色太深。
a. 在免疫組化時(shí)如果背景顯色太深,一方面需考慮使用適當(dāng)?shù)姆忾]液進(jìn)行封閉,例如選購(gòu)適當(dāng)?shù)姆忾]液或使用和一抗相同來(lái)源的血清(10%)進(jìn)行封閉。另一方面,請(qǐng)注意選購(gòu)經(jīng)過適當(dāng)吸附的二抗,以減少二抗的非特異性吸附。
b. 在免疫組化時(shí)如果背景顯色太深,需注意滅活內(nèi)源性過氧化氫酶。
c. 可以考慮縮短顯色時(shí)間,或降低二抗?jié)舛取?/p>
d. 選擇適當(dāng)強(qiáng)度的洗滌液,或延長(zhǎng)洗滌時(shí)間。
2. 沒有顯色或顯色太弱。
a. 可以考慮適當(dāng)提高一抗或二抗的濃度。檢測(cè)二抗效果,滴一滴稀釋二抗在膜上,檢測(cè)二抗是否可以被正常顯色。
b. 可以考慮使用更加靈敏的放大檢測(cè)體系,例如使用生物素檢測(cè)體系。
c. 可以適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間,另外確定抗原修復(fù)是否對(duì)于使用的一抗是必需的。
更多信息敬請(qǐng)?jiān)斣儯?br/>
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