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大氣壓離子化技術(shù)（API）是一類軟離子化方式，它的出現(xiàn)，成功地解決了二手LC-MS的接口問題，并逐漸發(fā)展成為成熟的技術(shù)。 二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MSAPI技術(shù) 主要包括離子噴霧離子化（ISI）、大氣壓化學(xué)離子化（APCI）和電噴霧離子化（ESI）3種模式。它們的共同點(diǎn)是樣品的離子化在處于大氣壓下的離子化室完成，離子化效率高，大大增強(qiáng)了分析的靈敏度和穩(wěn)定性。ESI，ISI和APCI，3種電離方式同時(shí)可作為二手LC-MS的接口。

二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MS-離子噴霧技術(shù)ISI

大多二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MS都要求有盡可能高的LC流速達(dá)到接口，目前ISI接口的上佳流速可達(dá)到50~200u1-min比原來的提高了10~20倍。在柱子出口和ESI探針間加一個(gè)溶劑N分離器可使柱流速從Iml.min減少到100ul.min進(jìn)入接口探針而對響應(yīng)無不良影響。

當(dāng)樣品有*，可應(yīng)用在低于1ulmin流速下有效工作的納（nano）一ESI接口。有靜態(tài)及動(dòng)態(tài)兩種nano-ESI接口，靜態(tài)nano-ESI裝置常特殊應(yīng)用于鑒定蛋白質(zhì)。而動(dòng)態(tài)nano-ESI裝置與毛細(xì)管電泳nano-LC微毛細(xì)管LC或毛細(xì)管電色譜聯(lián)用。流速常在30~1000nl.min.

二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MS-大氣壓化學(xué)離子化APCI技術(shù)

用于二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MS的APCI技術(shù)與傳統(tǒng)的化學(xué)電離接口不同，它并不采用諸如甲烷一類的反應(yīng)氣體，而是借助電暈放電啟動(dòng)一系列氣相反應(yīng)以完成離子化過程，就其原理，它也可被稱為放電電離或等離子電離。從二手液相色譜流出的樣品溶液進(jìn)入一具有霧化氣套管的毛細(xì)管，被氮?dú)饬黛F化，通過加熱管時(shí)被氣化。在加熱管端進(jìn)行電暈放電，溶劑分子被電離，充當(dāng)反應(yīng)氣，與樣品氣態(tài)分子碰撞，經(jīng)過復(fù)雜的反應(yīng)過程，樣品分子生成準(zhǔn)分子離子。

二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MS-電噴霧電離ESI

用于二手液質(zhì)聯(lián)用儀LC-MS的ESI技術(shù)過程中大致可以分為液滴的形成，去溶劑化，氣相離子的形成3個(gè)階段。

在ESI中，離子的形成是被測分子在帶電液滴的不斷收縮過程中噴射出來的，即離子化是在液態(tài)下完成的。經(jīng)二手液相色譜分離的樣品溶液流入離子源。在N2流下汽化后進(jìn)入強(qiáng)電場區(qū)域，強(qiáng)電場形成的庫侖力使小液滴樣品離子化，借助于逆流加熱N2分子離子顆粒表面液體進(jìn)一步蒸發(fā)，使分子離子相互排斥形成微小分子離子顆粒。這些離子可能是單電荷或多電荷，這取決于所得的帶有正、負(fù)電荷的分子中酸性或堿性基團(tuán)的體積和數(shù)量。多電荷離子峰的形成使質(zhì)量范圍為3000u的四極桿濾過器質(zhì)譜儀也能檢測到生物大分子的準(zhǔn)確分子量。

在電噴霧過程中，溶液中一種極性離子（比如正離子）隨著噴出的霧滴而離去，相反極性的離子（比如負(fù)離子）則留在毛細(xì)管的溶液中，如果毛細(xì)管為金屬材料并與高壓電源（Ve）的一極相連，那么留在毛細(xì)管中的這些離子會(huì)在金屬管壁上發(fā)生氧化或還原反應(yīng)，通過這些電化學(xué)反應(yīng)使溶液中電荷消失，從而維持連續(xù)地噴霧，例如OH-在金屬管壁上發(fā)生以下電化學(xué)反應(yīng)：伴隨電化學(xué)反應(yīng)會(huì)有氣體產(chǎn)生，因此在電路的連接上應(yīng)考慮此因素，否則在毛細(xì)管中會(huì)出現(xiàn)氣泡，影響電噴霧的穩(wěn)定性。