目錄:廣州億寧生物技術(shù)有限公司>>生物試劑>>Stemcell>> 07533Human Pluripotent Stem Cell-Derived Endoderm qPCR
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更新時(shí)間：2025-02-24 19:15:10瀏覽次數(shù)：174評(píng)價(jià)
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| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
人多能干細(xì)胞 （hPSC） 衍生的內(nèi)胚層定量聚合酶鏈反應(yīng) （qPCR） 芯片設(shè)計(jì)用于表征 hPSC 衍生的確定性?xún)?nèi)胚層祖細(xì)胞及其分化的后代，包括胰腺、肝臟和腸道細(xì)胞。該 qPCR 陣列提供了體外分化后 hPSC 衍生的內(nèi)胚層細(xì)胞的基因表達(dá)譜，并有助于開(kāi)發(fā)定向分化至內(nèi)胚層譜系的方案。根據(jù)它們?cè)趆PSCs中或在hPSC衍生的外胚層、中胚層和內(nèi)胚層譜系細(xì)胞（D'Amour等人）中的表達(dá)來(lái)選擇基因，包括胰腺（Kroon等人）、肝臟（Hay等人）和腸道祖細(xì)胞（Grapin-Botton和Melton）。
qPCR 用于確定多個(gè)樣品中基因表達(dá)的穩(wěn)態(tài) mRNA 水平的變化，通常歸一化為內(nèi)部對(duì)照基因的相對(duì)表達(dá)。基因特異性引物可擴(kuò)增從 mRNA 逆轉(zhuǎn)錄的 cDNA 庫(kù)中的靶序列，并且與 TaqMan® 技術(shù)一樣，雜交序列特異性探針提供來(lái)自 Taq DNA 聚合酶的 5' 核酸外切酶活性的熒光信號(hào)。熒光信號(hào)的積累速率用于定量樣品 cDNA，從而定量原始細(xì)胞裂解物中 mRNA 的量。
該 qPCR 芯片包含經(jīng)驗(yàn)證的引物和探針，用于檢測(cè) 90 個(gè)基因，這些基因的表達(dá)與 hPSC 或 hPSC 衍生的外胚層、間胚層和內(nèi)胚層細(xì)胞或胰腺、肝臟和腸道祖細(xì)胞相關(guān)，以及 6 個(gè)內(nèi)源性（管家）對(duì)照基因。TBP（TATA 盒結(jié)合蛋白）qPCR 對(duì)照模板作為合成 DNA 陽(yáng)性對(duì)照提供。其他基因信息和 qPCR 分析工具可在獲得。
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