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一．初始水溫的調(diào)控

水溫對水體微生物生長和生化耗氧速度具有很大的影響：

因此，在整個測定過程中，應(yīng)嚴(yán)格控制水樣溫度在20℃ ± 1℃ ，確保測定結(jié)果精密度和準(zhǔn)確度。

(1) 低溫水樣：

冬季采集水樣、冷藏保存水樣及冷凍保存水樣溫度遠(yuǎn)低于20℃ ，可以利用溫度計控制，敞口放入在20℃恒溫水浴鍋中進(jìn)行快速升溫并達(dá)到平衡。當(dāng)水溫達(dá)到要求時( 20± 1℃) 再測定，以減小分析誤差。

(2) 高溫水樣：

夏季采集水樣及受熱污染水樣溫度常高于20℃，可以利用溫度計控制，敞口放入20℃ 恒溫生化培養(yǎng)箱中進(jìn)行快速降溫并達(dá)到平衡。當(dāng)水溫達(dá)到要求時( 20 ± 1℃ )再測定，以減小分析誤差。

二．水樣pH值調(diào)節(jié)

由于水體微生物大多適于在中性或弱堿性( pH= 7. 2～7. 6) 環(huán)境中生存。

如果稀釋水中磷酸鹽緩沖溶液，起不到充分緩沖作用。

首先應(yīng)用 pH 計或廣泛pH試紙測試pH 值，用鹽酸溶液［c( HCl) = 0. 5 mol /L］或氫氧化鈉溶液［c( NaOH) = 0. 5 mol /L］調(diào)節(jié)水樣pH值至中性或弱堿性后，再作稀釋。調(diào)節(jié)液加入量不要超過水樣體積 0. 5%，操作過程中應(yīng)注意不要帶入氣泡。

若水樣酸度或堿度很高，可改用高濃度堿液或酸液進(jìn)行中和。

三. 水樣含鹽量調(diào)節(jié)

微生物分解有機(jī)物生化反應(yīng)須在有充足營養(yǎng)鹽環(huán)境下進(jìn)行。

如果樣品含鹽量低，電導(dǎo)率小于125μs /cm, 可由于營養(yǎng)鹽不足而影響微生物活性，從而影響水樣 BOD5 測定結(jié)果。

因此，測定前，須用電導(dǎo)率儀檢測水樣電導(dǎo)率，并向低含鹽量(電導(dǎo)率小于125 μs /cm) 水樣中加入等體積四種鹽溶液，調(diào)節(jié)水樣電導(dǎo)率至 125 μs /cm 。

四．初始溶解氧調(diào)控

微生物分解有機(jī)物生化反應(yīng)須在好氧條件下進(jìn)行。溶解氧濃度影響反應(yīng)進(jìn)度。

測定前，須嚴(yán)格控制好水樣初始溶解氧濃度。

① 若水樣初始溶解氧濃度低于2.0mg/L：可采用稀釋或接種稀釋方法以提高水樣溶解氧濃度。（原因：不未能給微生物生理生化活動提供足夠溶解氧，致使該生化反應(yīng)很難進(jìn)行）。

② 溶解氧過飽和：從水溫較低(冬季)水域或富營養(yǎng)化湖泊、水庫采集水樣，可遇含過飽和溶解氧情況。

測定前將水樣經(jīng)初始水溫的調(diào)控，使水樣迅速升溫至 20℃后，將水樣全部轉(zhuǎn)移至1000 mL量筒中，隨即平搖量筒 5～10 次，以趕出過飽和溶解氧。否則會造成分析結(jié)果偏高(過飽和溶解氧自行逸出而損失)。

③ 負(fù)值現(xiàn)象：

從水溫較高( 夏季) 水域或熱污染排放口采集水樣，可遇溶解氧濃度較低情況，測定前將水樣經(jīng)初始水溫的調(diào)控，使水樣迅速降溫至 20℃ 后，將水樣全部轉(zhuǎn)移至1 000 mL 量筒中，隨即平搖量筒 5～10 次，利用大氣復(fù)氧作用使之與空氣中氧分壓接近平衡。否則會造成分析結(jié)果偏低，甚至為負(fù)值現(xiàn)象。