熒光顯微鏡是一種利用熒光現(xiàn)象進(jìn)行觀察的特殊光學(xué)顯微鏡，在生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。
熒光顯微鏡利用被稱為熒光的自然現(xiàn)象。在熒光顯微鏡下，通過激發(fā)樣品內(nèi)部的某些細(xì)胞結(jié)構(gòu)或者分子等，使他們進(jìn)入到激發(fā)態(tài)，當(dāng)它們回到基態(tài)時(shí)，會釋放出可見光區(qū)的光，通過放大并檢測此熒光來生成圖像。因?yàn)闊晒庵粡谋患ぐl(fā)的分子發(fā)射出來，所以它可以提供高度選擇性的成像能力。
工作原理：
1、激發(fā)熒光：使用特定波長的光照射樣本，樣本中的熒光物質(zhì)吸收激發(fā)光能量后躍遷至高能級狀態(tài)。
2、發(fā)射熒光：處于激發(fā)態(tài)的熒光物質(zhì)不穩(wěn)定，返回基態(tài)時(shí)發(fā)射出波長更長的熒光。
3、濾光成像：通過激發(fā)濾光片確保特定波長激發(fā)光照射樣本，阻擋濾光片僅允許熒光信號到達(dá)觀察者，配合暗視野背景形成高對比度圖像。
熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。
功能：
1、熒光標(biāo)記觀察：對細(xì)胞內(nèi)特定分子進(jìn)行熒光標(biāo)記，實(shí)時(shí)監(jiān)測其動態(tài)變化。
2、高對比度成像：暗視野背景與熒光信號形成強(qiáng)反差，可分辨微弱熒光信號。
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