化工儀器網
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7322 |
細胞簡介：
小鼠表皮角質形成分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構，由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。表皮角質形成細胞是一種能合成角質蛋白的上皮細胞，此類細胞為表皮的主體，由表皮深層始逐漸增殖、分化，并在成為角化的角質細胞中，細胞核與細胞器消失，細胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機體尚有保護作用，故不必在洗擦身體時用力搓擦，使其過早脫失。表皮角質形成細胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后，細胞產生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細胞容易導致終末分化，不能充分增殖。角質形成細胞最終產生角質蛋白，在其向角質細胞演變過程中，一般可以分為四層，即基底層、棘層、顆粒層以及角質層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外，在某些部位，特別在掌跖部位，角質層下方還可見到透明層。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠表皮角質形成層細胞先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠表皮角質形成經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品：
鹽酸克倫特羅檢測試紙條 Detection of clenberol sip
萊克多巴胺檢測試紙條（尿樣） Ractopamine test sip (urine)
萊克多巴胺檢測試紙條(組織) Ractopamine test sip (Organization)
霉素檢測試紙條（液態(tài)樣品） Chloramphenicol detection test sip (liquid sample)
鴨α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human adrenal coex aibody (AAA) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質抗體(AAA)試劑盒
HumanFolicacid,FAELISAKit 人(FA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforAChEELISAKit大鼠乙酰酯酶
藥品阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性試劑盒20次
Mousephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit小鼠0酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)試劑盒規(guī)格：96T/48T
HRAS樣抑制因子2抗體
尾型同源盒轉錄因子2重組兔單克隆抗體
NXPH1重組大鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 Protein
HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta 0.5mgHIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧誘導因子1β 抗原
PLA2G7重組人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein
CANX Protein Human 重組人 CANX / Calnexin 蛋白 (Fc 標簽)
CD300A Protein Mouse 重組小鼠 CD300A 蛋白 (Fc 標簽)
HIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta 0.5mgHIF-1 Beta/ARNT1(Hypoxia-inducible factor-1 Beta) 缺氧誘導因子1β 抗原
CANX Protein Human 重組人 CANX / Calnexin 蛋白 (Fc 標簽)
NXPH1重組大鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 Protein
CD300A Protein Mouse 重組小鼠 CD300A 蛋白 (Fc 標簽)
PLA2G7重組人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein
小鼠表皮角質形成細胞大鼠環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒 ，英文名： cGMP ELISA Kit
Rabbit ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 兔抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒
登革熱病毒通用型(DFV-U)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein6,IGFBP-6ELISAkit小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6
體液還原型(GSH)濃度高效液相色譜定量試劑盒50次
ELISAKitPⅠCP人Ⅰ型前膠原羧基端肽
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
化工儀器網