化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）ELISA試劑盒洗滌方法
閱讀：1093 發(fā)布時間：2021-9-23小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒洗滌方法：
1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準品溶液。
2.棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準孔出現(xiàn)明顯梯度時，即可終止)。
7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體
錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體
脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體
載脂蛋白L3抗體
腫瘤/睪丸抗原抗體81抗體
共濟失調(diào)蛋白7樣2抗體
芳香基硫酸酯酶1抗體
精氨酸t(yī)RNA的蛋白轉(zhuǎn)移酶1抗體
共濟失調(diào)蛋白7樣1抗體
孤獨癥易感基因2蛋白抗體
脊髓小腦共濟失調(diào)2型蛋白抗體
芳香基硫酸酯酶H抗體
溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體
載脂蛋白1抗體
突觸融合結(jié)合蛋白6抗體
精氨酸酶1抗體
腺苷酸激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白7抗體
磷酸化鈉鉀ATP酶α1多肽抗體
Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATP酶α1抗體
肌動蛋白樣蛋白6B抗體
脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白7抗體
磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體
β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體
載脂蛋白E抗體
甲胎蛋白AFP抗體