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應(yīng)用發(fā)光細(xì)菌檢測水質(zhì)毒性與環(huán)境毒性
應(yīng)用發(fā)光細(xì)菌檢測水質(zhì)毒性與環(huán)境毒性、
簡介：
發(fā)光細(xì)菌是一類在正常的生理條件下能夠發(fā)射可見光的細(xì)菌。發(fā)光細(xì)菌在正常的生理條件下能發(fā)出波長在450～490nm 的藍(lán)綠色可見光，在一定的試驗條件下發(fā)光強度是恒定的。與外來受試物接觸后，由于毒物具有抑制發(fā)光的作用，發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強度即有所改變，變化的程度與受試物的濃度在一定范圍內(nèi)呈相關(guān)關(guān)系，同時與該物質(zhì)的毒性大小有關(guān)。
利用發(fā)光細(xì)菌來檢測有毒物質(zhì)，由于有毒物質(zhì)僅干擾發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光系統(tǒng)，發(fā)光強度的變化可以用發(fā)光光度計測出，費時較少且靈敏度高，操作簡便，結(jié)果準(zhǔn)確，所以利用發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強度作為指標(biāo)來監(jiān)測有毒物質(zhì)，在國內(nèi)外越來越受到重視，在環(huán)境監(jiān)測中的應(yīng)用也越來越廣泛。我國于1995年將這一方法列為環(huán)境毒性檢測的標(biāo)準(zhǔn)方法(GB／T15441—1995)。
目前國內(nèi)常用的3種發(fā)光細(xì)菌為：明亮發(fā)光桿菌、費氏弧菌、青?；【?。其中明亮發(fā)光桿菌在“GB/T15441-1995 水質(zhì) 急性毒性的測定 發(fā)光細(xì)菌法”中所使用；費氏弧菌在歐盟的標(biāo)準(zhǔn)中所使用；青?；【窃谇嗪：聂~體內(nèi)提取的菌種，屬淡水菌，在測試飲用水時有較大優(yōu)勢。
檢測方法：
以明亮發(fā)光桿菌T3小變種檢測為例：
1. 試劑與材料準(zhǔn)備
發(fā)光細(xì)菌凍干粉復(fù)蘇：使用3%的氯化鈉復(fù)蘇發(fā)光細(xì)菌凍干粉，然后稀釋到1萬細(xì)胞/ml，形成工作液
參比毒物：制作不同濃度的作為參比毒物0.02 - 0.24mg/L
樣品：采集或準(zhǔn)備相應(yīng)的待測樣品，使用蒸餾水稀釋，然后加入氯化鈉（終濃度3%）
2. 儀器
單管或微孔板發(fā)光檢測儀
3. 樣品檢測
取一定量的發(fā)光細(xì)菌工作液，放入發(fā)光檢測儀中檢測發(fā)光值；加入待測樣品，混勻，孵育15分鐘；孵育完成后，檢測殘留發(fā)光值。