適用范圍：本方法適用于BOD5或等于2mg/L并且不超過6000mg/L的水樣。BOD5大于6000mg/L的水樣仍可用本方法，但由于稀釋會(huì)造成誤差，有必要要求對測定結(jié)果做慎重的說明。本試驗(yàn)得到的結(jié)果是生物化學(xué)和化學(xué)作用共同產(chǎn)生的結(jié)果，它們不象單一的、有明確定義的化學(xué)過程那樣具有嚴(yán)格和明確的特性，但是它能提供用于評(píng)價(jià)各種水樣質(zhì)量的指標(biāo)。本試驗(yàn)的結(jié)果可能會(huì)被水中存在的某些物質(zhì)所干擾，那些對微生物有毒的物質(zhì)，如殺菌劑、有毒金屬或游離氯等，會(huì)抑制生化作用。水中的藻類或硝化微生物也可能造成虛假的偏高結(jié)果。
原理：將水樣注滿培養(yǎng)瓶，塞好后應(yīng)不透氣，將瓶置于恒溫條件下培養(yǎng)5天。培養(yǎng)前后分別測定溶解氧濃度，由兩者的差值可算出每升水消耗掉氧的質(zhì)量，即BOD5值。由于多數(shù)水樣中含有較多的需氧物質(zhì)，其需氧量往往超過水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培養(yǎng)前需對水樣進(jìn)行稀釋，使培養(yǎng)后剩余的溶解氧（DO）符合規(guī)定。一般水質(zhì)檢驗(yàn)所測BOD5只包括含碳物質(zhì)的耗氧量和無機(jī)還原性物質(zhì)的耗氧量。有時(shí)需要分別測定含碳物質(zhì)耗氧量和硝化作用的耗氧量。常用的區(qū)別含碳和氮的硝化耗氧的方法是向培養(yǎng)瓶中投加硝化抑制劑，加入適量硝化抑制劑后，所測出的耗氧量既為含碳物質(zhì)的耗氧量。在5天培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，硝化作用的耗氧量取決于是否存在足夠數(shù)量的能進(jìn)行此種氧化作用的微生物，原污水或初級(jí)處理的出水中這種微生物的數(shù)量不足，不能氧化顯著量的還原性氮，而許多二級(jí)生化處理的出水和受污染較久的水體中，往往含有大量硝化微生物，因此測定這種水樣時(shí)應(yīng)抑制其硝化反應(yīng)。在測定BOD5的同時(shí)，需要葡萄糖和谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液完成驗(yàn)證試驗(yàn)。
操作步驟
1樣品預(yù)處理
1.1樣品的中和
如果樣品的pH不在6-8之間，先做單獨(dú)試驗(yàn)，確定需要用的鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液的體積，再稱樣品，不管有無沉淀形成。
1.2含游離氯或結(jié)合氯的樣品
加入所需體積的氫氧化鈉溶液，使樣品中自由氯和結(jié)合氯失效，注意避免過量。
2試驗(yàn)水樣的準(zhǔn)備
將試驗(yàn)樣品溫度升至約20°C，然后再半充滿的容器內(nèi)搖動(dòng)樣品，以便消除可能存在的過飽和氧。
將已知體積樣品置于稀釋容器中，用稀釋水或接種稀釋水稀釋，輕輕地中和，避免夾雜空氣泡。
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