細胞計數(shù)對于細胞濃度和活力的可重現(xiàn)和準確記錄非常重要，可用于一系列研究、醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)應(yīng)用。盡管臺盼藍存在許多記錄在案的問題和局限性，但它仍然被廣泛用于許多研究實驗室。本文旨在重點介紹赤蘚紅素 B，這是一種毒性較小且無憂的臺盼藍細胞活力染料替代品。
但首先，讓我們了解臺盼藍的局限性。該列表的最頂部是臺盼藍對人和細胞的毒性。臺盼藍會因染料吸收而隨著時間的推移降低細胞活力。建議在混合樣品后盡快計數(shù)細胞。大量研究還表明，臺盼藍具有潛在致癌性，可導(dǎo)致細胞周期和細胞死亡調(diào)節(jié)發(fā)生變化 （1-6）。因此，它被貼上了對動物和環(huán)境有害的標簽。
臺盼藍在儲存過程中容易沉淀，在血球計數(shù)器和/或自動細胞計數(shù)儀上計數(shù)時可能表現(xiàn)為碎片。保持臺盼藍的清潔需要加熱、過濾或離心以去除晶體，以避免干擾細胞計數(shù)或錯誤表征細胞。此外，細胞樣品中存在碎片使得區(qū)分無核細胞與真碎片、死細胞或晶體極為困難。由于這些限制，它可能導(dǎo)致個體高度主觀計數(shù)和自動細胞計數(shù)不準確。對于活力低于 80% 的樣品尤其如此。此外，臺盼藍還可以與培養(yǎng)基或血清中的蛋白質(zhì)結(jié)合，這會干擾其與死細胞的適當結(jié)合親和力。
以上所有情況都可能導(dǎo)致在研究的許多關(guān)鍵點為優(yōu)化或標準化用于藥物開發(fā)、細胞治療或數(shù)據(jù)生成的方案收集的數(shù)據(jù)不一致。
介紹赤蘚紅素 B，一個更好、更明亮的選擇！ 赤蘚紅素 B 在國際上用作低劑量的食品添加劑，被歸類為無毒。它是一種生物安全染料，用于染料排斥測試以測量細胞活力。與臺盼藍類似，該測定基于以下原理：具有完整細胞膜的活細胞會排除染料的極性分子并保持未染色，而膜受損的死細胞則不會，因此看起來更暗。
赤蘚紅 B 細胞活力檢測依賴于與臺盼藍檢測相同的原理，其中活細胞排除染料，而受損細胞被染色。然而，與臺盼藍相比，赤蘚紅素 B 的一些優(yōu)勢包括與細胞混合時毒性較低、在不同溫度和儲存條件下的穩(wěn)定性以及減少血清蛋白的結(jié)合。赤蘚紅素 B 相對于臺盼藍的這些優(yōu)勢顯著減少了在細胞活力和群體密度測定過程中導(dǎo)致細胞錯誤表征的變量。這會產(chǎn)生更準確和可靠的計數(shù)。
可以理解的是，一些研究人員仍然對從臺盼藍染色轉(zhuǎn)向赤蘚紅 B 染色心存疑慮，因為臺盼藍歷來是細胞計數(shù)的黃金標準方法。這通常是由于他們不愿意更改當前的協(xié)議。然而，赤蘚紅 B 可以使用相同的檢測方案、硬件和類似的儀器設(shè)置來替代臺盼藍。臺盼藍和赤蘚紅素 B 之間也沒有顯著的價格差異。
赤蘚紅素 B 是臺盼藍的毒性較小的替代品，具有多種優(yōu)勢，可實現(xiàn)更可靠的細胞計數(shù)。雖然臺盼藍是細胞計數(shù)的傳統(tǒng)標準品，但研究表明，赤蘚紅 B 是一種易于使用、成本效益高且毒性較小的替代品。
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