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體視顯微鏡在雞蛋胚胎觀察中的應(yīng)用
閱讀：2310 發(fā)布時(shí)間：2021-4-27
在大量的化妝品廣告中我們都能夠聽(tīng)到“無(wú)刺激，低刺激，零刺激”等宣傳語(yǔ)，那么除了自體測(cè)試以外實(shí)驗(yàn)室是怎么測(cè)試化妝品的刺激性呢？
現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室中已經(jīng)用雞胚模型代替了大部分的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，因?yàn)榉趸碾u蛋胚胎中期表面血管豐富，可以看作一個(gè)完整的生物體，且表面透明便于在實(shí)驗(yàn)中觀察血管及其網(wǎng)絡(luò)的形態(tài)結(jié)構(gòu)、顏色和通透性的變化，結(jié)合絨毛尿囊膜蛋白質(zhì)性質(zhì)改變判斷其受損程度，評(píng)估受試物的刺激性。此研究方法經(jīng)濟(jì)，且實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)單，易操作。
實(shí)驗(yàn)方法：將在恒溫恒濕孵育箱中孵育至第九天至第十天的受精雞蛋取出到無(wú)菌操作臺(tái)，從雞蛋的氣室端剪開(kāi)蛋殼，小心剝?nèi)サ澳ぜ绰冻鲅芑慕q毛尿囊膜。肉眼觀察尿囊膜的完整性及有無(wú)出血點(diǎn)等變化，如有出血點(diǎn)或尿囊膜破損則剔除，不能用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。將100μl的液體受試物加入置于CAM上限定面積的無(wú)刺激性橡膠環(huán)內(nèi),環(huán)直徑1.5cm。固體受試物0.11g,用水濕潤(rùn)后,均勻的涂在直徑1.5cm的無(wú)刺激性樹(shù)脂薄片上,與CAM接觸。20s后,用5ml的溫?zé)嵴麴s水輕輕沖洗。
在一段時(shí)間之后用體視顯微鏡觀察絨毛尿囊膜上的血管及其網(wǎng)絡(luò)的形態(tài)結(jié)構(gòu)、顏色和通透性的變化(溶血、出血、凝血)，結(jié)合絨毛尿囊膜蛋白質(zhì)性質(zhì)改變判斷其受損程度，評(píng)估受試物的刺激性。用顯微鏡相機(jī)MS60進(jìn)行原位攝影，記錄及分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
雞胚模型實(shí)驗(yàn)驗(yàn)條件簡(jiǎn)單，材料易于獲取，方法易于掌握，應(yīng)用范圍廣泛可檢測(cè)洗滌類(lèi)產(chǎn)品及其表面活性劑原料的刺激性、化妝品、護(hù)膚品、等的毒性實(shí)驗(yàn)，在日用化妝品公司、藥廠等都會(huì)應(yīng)用。體視顯微鏡加顯微鏡相機(jī)是該實(shí)驗(yàn)的必要配置。