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葉綠素儀的原理和使用方法介紹
閱讀：1481 發(fā)布時(shí)間：2021-2-19
葉綠素儀是一種葉綠素測(cè)量?jī)x器，能夠在較短時(shí)間內(nèi)測(cè)量出農(nóng)作物葉綠素含量，儀器精致小巧、攜帶方便，同時(shí)測(cè)量方法也十分簡(jiǎn)單，只需要將葉片放置于葉綠素測(cè)定儀的探頭上并合上測(cè)量探頭就可以測(cè)量獲得農(nóng)作物葉綠素含量。
通過這種儀器有利于合理施加氮肥，提高氮的利用率，并可保護(hù)環(huán)境（防止施加過多的氮肥而使環(huán)境特別是水源受到污染），因此，葉綠素儀廣泛應(yīng)用于農(nóng)林相關(guān)科研單位和高校對(duì)植物生理指標(biāo)的研究和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的指導(dǎo)。
葉綠素儀的原理：
葉綠素儀根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收，利用分光光度計(jì)在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A=αCL式中：α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì)，則此混合液在某一波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測(cè)定該提取液在三個(gè)特定波長(zhǎng)下的吸光度A，并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排除類胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的大吸收峰。
葉綠素儀的使用方法：
1、首先將葉綠素儀的測(cè)量頭夾在葉片兩端，按下測(cè)量頭。
2、在使用葉綠素儀校準(zhǔn)過程中，測(cè)量頭不夾樣品，二個(gè)LED次序發(fā)光，被接收的光轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，光強(qiáng)度的比率被用來(lái)計(jì)算。
3、在葉綠素儀的測(cè)量頭夾住樣品后，二個(gè)LED再次發(fā)光，通過葉片傳輸?shù)墓獯虻浇邮掌魃希晦D(zhuǎn)換成電信號(hào)，傳輸光的強(qiáng)度比率被計(jì)算。
4、步驟1和2的值用于計(jì)算SPAD測(cè)量值，就可以分析出所測(cè)葉片的葉綠素含量。