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摘要 軟飲料、果汁和預(yù)先制好的茶飲料都是很流行的飲料，它們都 有很嚴(yán)格的配方，以使其具有香味，并確保產(chǎn)品的穩(wěn)定 性。許多最終產(chǎn)品的生產(chǎn)廠具有監(jiān)測重要成分的方法，如測定 糖分、香味、著色劑、防腐劑等，但可能會(huì)發(fā)現(xiàn)在需求量大的 季節(jié)，分析速度無法跟上生產(chǎn)需求。這里，我們選擇一種添加 劑和甜味劑的經(jīng)典分析方法，把它轉(zhuǎn)換為能夠提高樣品通量和 分離度的新方法，同時(shí)還能降低溶劑消耗量。

引言 質(zhì)量控制 (QC) 實(shí)驗(yàn)室總是面臨這樣的挑戰(zhàn)，要以較 少的儀器和人員滿足越來越高的樣品負(fù)荷，但在分析 處理過程中，數(shù)據(jù)質(zhì)量不能受到影響。盡管一些實(shí)驗(yàn) 室已經(jīng)成功地采用了更為自動(dòng)化的樣品制備和數(shù)據(jù)處 快速篩查和分析非酒精的成分 應(yīng)用 (5989-5178CHCN) 理方式，他們?nèi)栽趯ふ覚C(jī)會(huì)進(jìn)一步提高色譜通量。在 5 或 10 µm 粒徑色譜柱上的方法，如改用裝填有小粒 徑填料的直徑較小的色譜柱，就可以實(shí)現(xiàn)方法的更新。 從事添加劑、防腐劑、香精和甜味劑等小分子分析的 飲料 QC 實(shí)驗(yàn)室就面臨x機(jī)會(huì)。在方法開發(fā)和研 究實(shí)驗(yàn)室，與質(zhì)譜儀離子源的兼容性也是減小色譜柱 的大小、支持低流速運(yùn)行的一大驅(qū)動(dòng)力。

在縮短分析時(shí)間的同時(shí)，為了使得分離度不受影響， 我們可以同時(shí)減小色譜柱的長度和填料粒徑。如果考 慮梯度延遲體積和實(shí)際的柱外擴(kuò)散效應(yīng)，對 HPLC 系 統(tǒng)進(jìn)行合理的優(yōu)化，很容易獲得平衡的效果。例如， 一根 5 µm 粒徑、250 mm 柱長的色譜柱可以被 3 µm 粒徑、150 mm 柱長的色譜柱所取代。

換而言之，如 果長度與粒徑的比例相等，則認(rèn)為這兩根色譜柱具備 相同的分離能力。溶劑消耗量成比例減少，并且，如 果可以成功注入相等質(zhì)量的被分析物，由于其以相同 的效率在一根較小的色譜柱中運(yùn)行，色譜峰的稀釋作 用降低了，因而靈敏度也將得到提高。 已經(jīng)得到證實(shí)，與一般的 LC/UV (UV/Vis 光學(xué)檢測) 方法相比，LC/MS（液相色譜/質(zhì)譜）離子源在較低 的流速下靈敏度更高，電噴霧離子化方式尤其如此。

對于等度洗脫，在上述條件下一般可以得到很好的方 法轉(zhuǎn)換結(jié)果，總體分離度沒有或幾乎沒有變化。還有其 它一些參數(shù)也應(yīng)考慮。第一，是柱效與流速的關(guān)系， 或者更確切地說，柱效與 van Deemter [1] 和他人所 提出的線速度之間的關(guān)系；第二，是通常被忽略的柱 外擴(kuò)散效應(yīng)對實(shí)際柱效或經(jīng)驗(yàn)柱效的影響。 

Van Deemter 發(fā)現(xiàn)并給出了柱效與一系列參數(shù)之間關(guān) 系的數(shù)學(xué)表達(dá)式，但是這里我們最感興趣的，是對于 任何給定的粒徑的 HPLC 填充柱中，存在最佳的線 速度，并且最佳線速度隨著粒徑的減小而提高。直觀 起見，常以 van Deemter 圖來表示板高與線速度之 間的關(guān)系。一般說來，粒徑減小導(dǎo)致柱效升高，線速 度升高，最高柱效的范圍擴(kuò)大，可以在更寬的流速范 圍內(nèi)獲得好的分離效能。

如梯度斜率大，則梯度變化大且分離度較小，而較小 的梯度斜率可得到較高的分離度，但在同時(shí)，溶劑消 耗量增加，靈敏度降低。在分析時(shí)間和運(yùn)行壓力允許 的范圍內(nèi)，可以通過延長梯度時(shí)間或加大流速，使得 梯度斜率降低，也可以同時(shí)改變梯度時(shí)間和流速。 分離度隨梯度斜率的減小而提高，這是因?yàn)橛行萘?因子 k* 增大了。和等度分離類似，容量因子稱為 k’， 該值增大，將直接導(dǎo)致分離度的提高。k 值約在 5～10 之間時(shí)，這一效應(yīng)非常明顯，而超出這一范圍后的影 響極為有限。以下的例子中，我們將看到與上述討論 的計(jì)算相關(guān)的結(jié)果。

結(jié)論 對梯度斜率進(jìn)行認(rèn)真的轉(zhuǎn)換計(jì)算，并結(jié)合亞 2 µm 填 料的最佳線速度，有助于用戶很好地應(yīng)用小規(guī)格色 譜柱，在保持分離度不受影響的同時(shí)能夠縮短分析 時(shí)間。對柱外體積的優(yōu)化有助于避免影響柱效的分 離度損失，確保獲得最大的分離度，并縮短分析時(shí) 間。我們已經(jīng)證明這種方法轉(zhuǎn)換可以用于分析典型 飲料中復(fù)雜的添加劑混合物。如果用戶對本應(yīng)用報(bào) 告或其他方法轉(zhuǎn)換有任何問題，歡迎與我們聯(lián)系。