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Revvity小動(dòng)物活體光學(xué)成像技術(shù)已在生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、臨床前醫(yī)學(xué)研究及藥物 研發(fā)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。尤其藥物研發(fā)已經(jīng)是活體光學(xué)成像技術(shù)應(yīng)用的熱點(diǎn)領(lǐng)域。 利用小動(dòng)物光學(xué)成像技術(shù)可在活體水平 1.對(duì)治療腫瘤、炎癥、感染性疾病、神經(jīng)性 疾病等疾病的藥物藥效學(xué)進(jìn)行評(píng)價(jià)；2.對(duì)藥物在動(dòng)物體內(nèi)的分布代謝靶向進(jìn)行研究 ；3.對(duì)進(jìn)行評(píng)價(jià)。Revvity的小動(dòng)物活體光學(xué)成像技術(shù)已廣泛應(yīng)用于藥物的臨 床前研發(fā)階段，在藥物研發(fā)中應(yīng)用已經(jīng)非常成熟，全球各大制藥企業(yè)均已采用活體光 學(xué)成像技術(shù)開(kāi)展抗腫瘤、抗感染等藥物的研發(fā)，其中已有6種藥物獲得FDA認(rèn)證，另有8種藥物處于臨床測(cè)試階段。

藥效學(xué)評(píng)價(jià)

1. 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)

抗腫瘤藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)是小動(dòng)物光學(xué)成像技術(shù)的基礎(chǔ)應(yīng)用之一，利用熒光素酶標(biāo) 記腫瘤細(xì)胞，并移植入動(dòng)物體內(nèi)建立腫瘤疾病動(dòng)物模型，給藥后應(yīng)用小動(dòng)物活體光學(xué) 成像技術(shù)觀測(cè)腫瘤光學(xué)信號(hào)隨時(shí)間的變化情況，進(jìn)而評(píng)價(jià)不同藥物、特定的給藥途 徑、時(shí)間、劑量等給藥策略對(duì)于腫瘤的治療效果，如下圖就利用小動(dòng)物活體光學(xué)成像 技術(shù)評(píng)價(jià)了PD-0332991(PD-991)、阿瓦斯汀（Avastin）、多西他賽（docetaxel，TXT） 的抗腫瘤效果。

藥效評(píng)價(jià)研究：利用螢火蟲(chóng)熒光素酶標(biāo)記MDA-MB-435乳腺癌細(xì)胞株，將細(xì)胞注入小鼠腎包膜下構(gòu)建腎包 膜腫瘤模型，進(jìn)而對(duì)3種不同藥物或不同劑量的治療效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。（A,C）應(yīng)用IVIS成像系統(tǒng)長(zhǎng)期觀測(cè)3 種藥物對(duì)腎包膜乳腺癌移植瘤的治療效果，并進(jìn)行定量分析，結(jié)果顯示30 mg/kg Docetaxel（TXT）對(duì)腫瘤 的生長(zhǎng)抑制效果好；（B,D）應(yīng)用IVIS成像系統(tǒng)長(zhǎng)期觀測(cè)3種藥物對(duì)腎包膜乳腺癌移植瘤肺部轉(zhuǎn)移的抑 制效果，并進(jìn)行定量分析，結(jié)果顯示30 mg/kg Docetaxel（TXT）對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的抑制效果好。

Zhang et al.,Clin Cancer Res.2009;15(1):238-46.

相對(duì)于觸診、腫瘤體積測(cè)量等傳統(tǒng)方法，利用高靈敏度的生物發(fā)光成像技術(shù)進(jìn)行 藥物評(píng)價(jià)，可以更靈敏的發(fā)現(xiàn)殘余病灶點(diǎn)或盡早發(fā)現(xiàn)腫瘤的復(fù)發(fā)，從而更準(zhǔn)確的對(duì)藥 物治療效果進(jìn)行判定，如下例：

提高藥效評(píng)價(jià)準(zhǔn)確性：利用螢火蟲(chóng)熒光素酶標(biāo)記PC-3M人前列腺腫瘤細(xì)胞株，建立腫瘤皮下移植模型進(jìn) 行藥物評(píng)價(jià)。左圖：對(duì)照組，右圖：治療組。通過(guò)高靈敏度的生物發(fā)光成像技術(shù)可以準(zhǔn)確檢測(cè)出藥物治療 后的殘余病灶點(diǎn)，從而進(jìn)行正確的藥效評(píng)價(jià)，而如果通過(guò)觸診等傳統(tǒng)方法則可能做出錯(cuò)誤判斷。

利用生物發(fā)光成像技術(shù)進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)的另一優(yōu)勢(shì)在于，可以明確判斷藥物是 否有效殺死腫瘤活細(xì)胞。這是由于生物發(fā)光的原理是基于活細(xì)胞環(huán)境的酶促反應(yīng)，因 此，能夠發(fā)光的細(xì)胞必定是具有活性的。下圖所示為輝瑞公司抗腫瘤藥物Sutent的部 分研究結(jié)果，研究人員首先利用卡尺測(cè)量腫瘤體積的方法觀測(cè)該藥物對(duì)于腫瘤的生長(zhǎng) 抑制情況，發(fā)現(xiàn)該藥物能夠延緩腫瘤的生長(zhǎng)，但體積測(cè)量數(shù)據(jù)顯示腫瘤并未變小，研 究人員隨后利用生物發(fā)光成像技術(shù)進(jìn)行觀測(cè)，發(fā)現(xiàn)給藥一定時(shí)間后腫瘤光學(xué)信號(hào)顯著 降低，說(shuō)明該藥物對(duì)腫瘤活性細(xì)胞確實(shí)具有殺傷作用，同時(shí)說(shuō)明單獨(dú)依靠腫瘤體積測(cè) 量的方式無(wú)法準(zhǔn)確真實(shí)反映藥物治療效果。憑借活體光學(xué)成像的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，Sutent得以 順利通過(guò)FDA的認(rèn)證。

2.抗感染藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)

研究者在健康和粒細(xì)胞減少CD-1小鼠腹腔注射細(xì)菌熒光素酶標(biāo)記耐甲氧西林的金 黃色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus， MSSA）建立腹腔炎小 鼠模型。應(yīng)用不同抗生素治療腹腔炎小鼠，Revvity的 IVIS系統(tǒng)成像顯示服用達(dá)托霉素 （Daptomycin）小鼠的生物發(fā)光強(qiáng)度顯著下降。結(jié)果說(shuō)明達(dá)托霉素相對(duì)于其他抗生素 。

藥物（包括萘夫西林，萬(wàn)古霉素，利奈唑胺）顯示更強(qiáng)和更快地殺菌活性，對(duì)腹 腔炎的治療效果更顯著。

Mortin et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2007,51(5): 787–1794

人乳頭瘤病（Human papillomavirus, HPV）誘導(dǎo)引發(fā)宮頸癌。螢火蟲(chóng)熒光素酶 標(biāo)記人乳頭瘤病皮膚感染的BALB/c小鼠模型，Revvity的 IVIS系統(tǒng)成像顯示病的 生物發(fā)光強(qiáng)度在皮下接種TA-CIN和GPI-0100疫苗的小鼠中明顯消失，說(shuō)明這兩種疫 苗能夠極大地抑制人乳頭瘤病的生長(zhǎng)（下圖）。

與細(xì)菌、病感染研究類似，研究者也可通過(guò)熒光素酶基因標(biāo)記寄生蟲(chóng)，觀測(cè)其 在活體動(dòng)物體內(nèi)的感染情況。如Claes等人利用IVIS系統(tǒng)觀測(cè)了經(jīng)海腎熒光素酶基因 標(biāo)記的布氏錐蟲(chóng)（Trypanosoma brucei）在小鼠體內(nèi)的感染情況。體內(nèi)及體外成像結(jié)果 顯示，經(jīng)腹注射后，布氏錐蟲(chóng)選擇性分布于睪丸。布氏錐蟲(chóng)在睪丸的選擇性分布可能 會(huì)使其避開(kāi)藥物的作用，因?yàn)樵S多藥物無(wú)法通過(guò)睪丸-血管屏障而進(jìn)入睪丸。隨后的給 藥實(shí)驗(yàn)印證了這種推斷，在布氏錐蟲(chóng)感染小鼠5天后，用蟲(chóng)草素（cordycepin）連續(xù)進(jìn) 行三天處理，停藥后在第15天發(fā)現(xiàn)睪丸處重新出現(xiàn)布氏錐蟲(chóng)生物發(fā)光信號(hào)。這一研究 為開(kāi)發(fā)治療布氏錐蟲(chóng)感染的有效藥物提供了依據(jù)。

3. 抗炎癥藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)

治療關(guān)節(jié)炎藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)：小分子 APO866 是 前 B 細(xì)胞集落增強(qiáng)因子（Pre-B cell colony-enhancing factor, PBEF ） / 煙 酰 胺 磷 酸 核 糖 轉(zhuǎn) 移 酶 （ nicotinamide phosphoribosyltransferase, NAMPT）抑制劑。為了研究前 B 細(xì)胞集落增強(qiáng)因子/煙酰胺 磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶在炎癥性關(guān)節(jié)炎疾病中的調(diào)節(jié)作用，研究者將膠原蛋白誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎 小鼠灌輸APO866藥物。靜脈注射MMPSense750靶向的熒光試劑，監(jiān)測(cè)基質(zhì)金屬蛋白 酶活性而反映疾病炎癥。Revvity的 IVIS 系統(tǒng)成像顯示服用 APO0866 的小鼠金屬蛋白 酶活性下降，說(shuō)明APO886能夠通過(guò)抑制前 B細(xì)胞集落增強(qiáng)因子/煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移 酶治療炎癥性關(guān)節(jié)炎。

治療系統(tǒng)炎癥藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)：小動(dòng)物光學(xué)成像技術(shù)進(jìn)行抗炎癥藥物的研究，主 要是借助炎癥光學(xué)動(dòng)物模型即螢火蟲(chóng)熒光素酶標(biāo)記 NF- κB 基因的小鼠來(lái)實(shí)現(xiàn)， ( Nuclear factor-κB (NF- κB) 是細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子，NF- κB 對(duì)細(xì)胞凋亡，腫瘤發(fā)生，自體 免疫疾病和炎癥有重要作用,NF- κB 的表達(dá)往往伴隨著炎癥的發(fā)生和發(fā)展。牛樟菇 (Antrodia camphorate)是產(chǎn)自中國(guó)臺(tái)灣的一種傳統(tǒng)中藥，牛樟菇可以治療食物中，藥物中，痢疾，腹痛，高血壓，皮膚瘙癢和肝癌，在此研究中主要評(píng)價(jià)牛樟菇對(duì)炎癥的治 療效果。模型小鼠通過(guò)腹腔內(nèi)注射脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）后建立炎癥的模 型，使用Revvity的 IVIS系統(tǒng)成像系統(tǒng)生物發(fā)光成像可實(shí)時(shí)檢測(cè)NF- κB在用藥前后的 表達(dá)水平，進(jìn)而評(píng)價(jià)牛樟菇對(duì)炎癥的治療效果。從下圖可以看出小鼠服用牛樟菇后， 炎癥小鼠的生物發(fā)光強(qiáng)度下降（下圖左）。體外驗(yàn)證顯示牛樟菇治療后腸系膜淋巴結(jié) ，肝臟，脾臟和腎臟的生物發(fā)光強(qiáng)度下降（下圖右）。結(jié)果說(shuō)明牛樟菇能夠有效抑制 脂多糖引發(fā)的炎癥反應(yīng)。

Hseu et al, Food and Chemical Toxicity, 2010(418):2319-2325

帕金森癥是一種神經(jīng)退化型疾病，神經(jīng)炎癥被認(rèn)為在神經(jīng)細(xì)胞的損傷和凋亡過(guò) 程中起了很大作用。在大腦的黑質(zhì)致密部遞送抗炎癥和抗氧化劑可以有效的抑制神經(jīng) 炎癥和增加細(xì)胞活性，然而血腦屏障是進(jìn)行大分子和蛋白質(zhì)遞送到大腦的主要屏障。 研究人員使用 MPTP 帕金森小鼠模型，進(jìn)行納米制成的過(guò)氧化氫酶（Nanozyme, 抗炎 試劑）負(fù)載骨髓巨噬細(xì)胞的遞送。Revvity的 IVIS成像系統(tǒng)結(jié)果顯示，在骨髓巨噬細(xì)胞 的幫助下，過(guò)氧化氫酶可以成功的穿過(guò)血腦屏障進(jìn)入到大腦，從而治療帕金森癥。

Brynskikh et al, Nanomedicine (2010) 5(3), 379–396

5.脂肪代謝相關(guān)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià)

ThermoMouse 是一種新的轉(zhuǎn)基因報(bào)告小鼠，可允許研究人員實(shí)時(shí)地研究活體動(dòng)物 中的棕色脂肪活性。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在最近一期的《Cell Reports》雜志。棕色脂肪 燃燒能量的這種能力，其關(guān)鍵是解偶聯(lián)蛋白1（UCP1），在該小鼠模型中當(dāng)UCP1表達(dá) 時(shí)，熒光素酶隨之表達(dá)。因此通過(guò)生物發(fā)光檢測(cè)熒光素酶的表達(dá)，則可實(shí)時(shí)檢測(cè)UCP1 的表達(dá)，因此該模型可鑒定藥物對(duì)肥胖的治療效果。

Galmozzi et al., 2014, Cell Reports 9:1584–1593

減肥后脂肪量恢復(fù)的細(xì)胞過(guò)程具有普遍性，瘦素的mRNA水平與脂肪量有著密切 關(guān)系，因此瘦素的表達(dá)可以代表脂肪含量的改變。瘦素（Leptin，LP）是一種由脂肪組 織分泌的激素，人們之前普遍認(rèn)為它進(jìn)入血液循環(huán)后會(huì)參與糖、脂肪及能量代謝的調(diào) 節(jié)，促使機(jī)體減少攝食，增加能量釋放，抑制脂肪細(xì)胞的合成，進(jìn)而使體重減輕。為 了進(jìn)一步研究在不同條件下脂肪含量的變化，在此研究中建立了一種轉(zhuǎn)基因小鼠，在 該小鼠體內(nèi)重組的熒光素酶基因的表達(dá)受瘦素表達(dá)調(diào)節(jié)序列的調(diào)控，因此可以利用生 物發(fā)光來(lái)非侵入實(shí)時(shí)監(jiān)控瘦素的表達(dá)，從而衡量脂肪含量的變化，評(píng)價(jià)減肥藥物的使 用效果。研究結(jié)果表明，1、該轉(zhuǎn)基因小鼠瘦素的表達(dá)水平與熒光素酶活性高度一致， 可以通過(guò)活體成像檢測(cè)熒光素酶的表達(dá)來(lái)真實(shí)反映瘦素的表達(dá)量；2、在禁食后，重新 給予喂食6h后，瘦素表達(dá)增加，但是此時(shí)脂肪并未合成，因此提示脂-殆盡的脂肪細(xì)胞 在脂肪組織的滯留，在瘦素治療實(shí)驗(yàn)中同樣驗(yàn)證了這一論點(diǎn)。

藥物分布靶向研究

除了在藥效學(xué)中的應(yīng)用，小動(dòng)物活體光學(xué)成像也廣泛應(yīng)用于藥物在體內(nèi)靶向、分 布及代謝的研究。與藥效學(xué)中的應(yīng)用不同，此類應(yīng)用是以藥物為直接觀測(cè)對(duì)象，因此 標(biāo)記方式通常是利用熒光探針直接標(biāo)記藥物本身，通過(guò)追蹤熒光信號(hào)而反映藥物在體 內(nèi)的分布情況。如在研究抗體或多肽類藥物是否能夠有效靶向腫瘤的實(shí)驗(yàn)中，可以利 用熒光染料通過(guò)化學(xué)鍵的結(jié)合標(biāo)記目標(biāo)抗體或多肽，經(jīng)尾靜脈注射后，利用小動(dòng)物活 體光學(xué)成像系統(tǒng)觀測(cè)上述標(biāo)記對(duì)象的腫瘤靶向性，如下圖：

在研究藥物靶向的同時(shí)，了解不同時(shí)間點(diǎn)藥物在動(dòng)物體各個(gè)器官的分布及最終代 謝情況同樣。Revvity的FMT小動(dòng)物活體熒光斷層成像系統(tǒng)可以很好的滿足此 類應(yīng)用需求。應(yīng)用FMT成像系統(tǒng)，能夠?qū)晒鈽?biāo)記的藥物在深層器官的分布進(jìn)行斷層 掃描及三維重建，獲得真實(shí)準(zhǔn)確的三維定量數(shù)據(jù)，進(jìn)而對(duì)藥物的體內(nèi)分布代謝情況作 出正確分析。如下圖：

在對(duì)藥物分布進(jìn)行研究時(shí)尤其是小分子藥物，同位素標(biāo)記被視為金標(biāo)準(zhǔn)。原因是 用相對(duì)大分子量的熒光染料標(biāo)記小分子藥物，熒光染料本身即會(huì)對(duì)小分子藥物在體內(nèi) 的分布代謝產(chǎn)生影響，因此活體熒光成像技術(shù)并不是研究小分子藥物的最佳方法。 Revvity IVIS成像系統(tǒng)基于其超高的檢測(cè)靈敏度，可采集放射性同位素產(chǎn)生的切倫科夫 (Cerenkov)光信號(hào)，即帶電粒子在某特定介質(zhì)中以超過(guò)光在該介質(zhì)中的相速度運(yùn)動(dòng)時(shí)產(chǎn) 生藍(lán)光，利用這種現(xiàn)象對(duì)放射性同位素標(biāo)記的小動(dòng)物進(jìn)行成像稱之為切倫科夫成像。 例如Jeong Chan Parka利用124I-標(biāo)記藥物赫賽汀，尾靜脈注射荷瘤小鼠體內(nèi)后，利用 Revvity IVIS成像系統(tǒng)檢測(cè)其在腫瘤的分布。

切倫科夫輻射成像：應(yīng)用IVIS成像系統(tǒng)結(jié)合[18F]FDG放射性探針觀測(cè)腫瘤。A.腫瘤生物發(fā)光成像結(jié)果；B. 應(yīng)用IVIS系統(tǒng)進(jìn)行切倫科夫輻射成像，觀測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)[18F]FDG在腫瘤部位的代謝；C.應(yīng)用PET系統(tǒng)成 像，觀測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)[18F]FDG在腫瘤部位的代謝，結(jié)果與B一致。

事實(shí)上，直接通過(guò)熒光染料標(biāo)記藥物注入體內(nèi)的方式存在諸多問(wèn)題，如低靶向 性、低藥效性、免疫排斥、藥物性問(wèn)題等。因此，構(gòu)建新型藥物載體也是目前藥物 研究的熱點(diǎn)之一，應(yīng)用小動(dòng)物活體光學(xué)成像技術(shù)同樣可以在這一領(lǐng)域發(fā)揮作用。如下 圖所示為研究人員通過(guò)小動(dòng)物活體光學(xué)成像技術(shù)觀測(cè)一種新型納米共聚物給藥載體在 體內(nèi)運(yùn)載嗎啉基反義寡核苷酸靶向治療腫瘤的實(shí)驗(yàn)。此類給藥載體包含多種組分，如 起整體保護(hù)作用的外層多聚蘋果酸骨架及聚乙二醇、起腫瘤靶向作用的抗體連接組 分、藥物釋放組分、熒光染料結(jié)合位點(diǎn)等。結(jié)果表明，通過(guò)應(yīng)用新型納米給藥載體可 以有效提升藥物的靶向治療效果。

藥物性研究

除了進(jìn)行藥物靶向及分布代謝研究之外，小動(dòng)物光學(xué)成像技術(shù)還可用于評(píng)價(jià)藥物 的性。其中肝性評(píng)價(jià)是藥物研發(fā)的一個(gè)關(guān)鍵模塊，而許多藥物在臨床研究甚至上 市后才發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重肝性，這對(duì)藥物開(kāi)發(fā)公司和用藥患者都帶來(lái)了巨大的損害。斯坦福 大學(xué)Shuhendler教授在2014年發(fā)表一篇文章，在文章中就設(shè)計(jì)并研發(fā)了一種藥物肝性指示劑，可以根據(jù)藥物肝性的大小，發(fā)出不同的光。其原理是基于肝性的兩個(gè)關(guān) 鍵生物標(biāo)志物——活性氧（reactive oxygenspecies,ROS）和活性氮（reactive nitrogen species,RNS），二者的產(chǎn)生機(jī)制不同，因此對(duì)兩者同時(shí)檢測(cè)可廣泛的檢測(cè)藥物的。此指示劑是一種半導(dǎo)體聚合物納米粒（semiconducting polymer nanoparticle,SPN），包含三個(gè)核心元件：（1）靶向元件：通過(guò)聚乙二醇聯(lián)連接半乳糖 殘基，可以與肝細(xì)胞表面的半乳糖受體結(jié)合，是一種常見(jiàn)的肝靶向方法；（2 ）活性氧 感應(yīng)元件：化學(xué)發(fā)光劑雙草酸酯（ CPPO） 在活性氧存在的條件下，迅速分解產(chǎn)生高能 中間體1,2-二氧雜環(huán)丁烷二酮，激發(fā)附近染料分子發(fā)光，檢測(cè)發(fā)出的光子強(qiáng)度即可評(píng)價(jià) 活性氧的程度；（3）活性氮感應(yīng)元件：青色素染料IR775S發(fā)射680nm、820nm兩種熒 光，因熒光能量偏振轉(zhuǎn)移（FRET），發(fā)射的680nm的光子作為激發(fā)光激發(fā)染料分子發(fā) 射出820nm的光，而680nm光子減弱甚至消失；而在活性氮存在的條件下，F(xiàn)RET現(xiàn)象 消失680nm熒光信號(hào)增強(qiáng)，檢測(cè)此信號(hào)的強(qiáng)度即可評(píng)價(jià)活性氮的強(qiáng)度。

Nat Biotechnol. 2014 April ; 32(4): 373–380.

同樣也可以通過(guò)監(jiān)測(cè)與機(jī)體損傷相關(guān)基因的表達(dá)來(lái)評(píng)價(jià)藥物的性。其中血紅素 氧化酶1（Heme oxygenase-1，HO-1）就是一個(gè)關(guān)鍵的檢測(cè)目標(biāo)。物質(zhì)代謝、能量代 謝、藥物和物的生物轉(zhuǎn)化，都涉及氧化還原過(guò)程，并伴隨大量活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)的生成，而剛才也提到活性氧已經(jīng)被認(rèn)為是藥物性的一個(gè)標(biāo) 志。大量研究顯示，凡引起細(xì)胞ROS 水平增加的外來(lái)刺激，如性藥物、重金屬、 素等，大都能使HO-1的表達(dá)增加，起到抗氧化的作用，因此HO-1基因的表達(dá)可以用來(lái)評(píng)價(jià)藥物的性。將熒光素酶的基因插入小鼠HO-1基因啟動(dòng)子下游建立HO-1-Luc 轉(zhuǎn)基因小鼠，即可應(yīng)用生物發(fā)光的成像模式實(shí)時(shí)檢測(cè)HO-1基因的表達(dá)，進(jìn)而評(píng)價(jià)藥物 的性。 如下圖所示

Weisheng Zhang.et al.J Mol Med (2002) 80:655–664

血清淀粉樣蛋白A(Serum amyloid A,SAA)是一種急性期反應(yīng)蛋白，血中濃度主要 由合成速度決定，而肝功能正常時(shí)其合成主要決定于細(xì)胞因子的水平。當(dāng)組織發(fā)生感 染、炎癥或者損傷時(shí)，SAA可以誘導(dǎo)產(chǎn)生組織損傷修復(fù)過(guò)程所需的酶，吸引免疫細(xì)胞 到達(dá)炎癥部位加強(qiáng)免疫反應(yīng)作用。若藥物會(huì)引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生損傷或炎癥時(shí)，SAA的表達(dá) 會(huì)迅速上升，因此SAA也可以作為藥物性的一個(gè)標(biāo)志物。同樣我們建立SAA-Luc轉(zhuǎn) 基因小鼠即可評(píng)價(jià)藥物對(duì)肝臟的性，如下圖所示:

藥物代謝酶CYP3A在藥物代謝中發(fā)揮重要的作用，藥物對(duì)CYP3A的誘導(dǎo)表達(dá)可 加速合用藥物的代謝，因此CYP3A的表達(dá)水平可以評(píng)價(jià)藥物在肝臟的代謝情況。在進(jìn) 行實(shí)驗(yàn)時(shí)，可將熒光素酶基因重組到小鼠CYP3A基因的表達(dá)盒中，構(gòu)建CYP3A-luc轉(zhuǎn) 基因小鼠，當(dāng)藥物經(jīng)過(guò)肝臟進(jìn)行代謝時(shí)，CYP3A的表達(dá)增高，同樣熒光素酶的表達(dá)也 隨之增加，在注射底物熒光素時(shí)，即可產(chǎn)生生物發(fā)光的信號(hào)，信號(hào)的強(qiáng)度即代表了藥 物肝代謝的水平。目前CYP3A4-Luc轉(zhuǎn)基因小鼠，并且已經(jīng)被用于快速、大量篩選觀 察藥物在肝臟代謝情形及中草藥對(duì)藥物代謝的影響。

W. Zhang et al.Biochemical Pharmacology 65 (2003) 1889–1896