DIN/ISO標準將物體側(cè)面的景深定義為“物體平面兩側(cè)空間的軸向深度，物在該深度范圍內(nèi)移動時沒有可檢測到的圖像清晰度損失，且圖像平面和物鏡的位置保持不變"。

然而，該標準沒有給出任何關(guān)于焦點虛化檢測閾值的測量方法。Max Berek是就人眼景深發(fā)表文章的作者，早在1927年，他就已經(jīng)將自己通過廣泛實驗獲得的結(jié)果公布于世。Berek公式給出了人眼景深的實際值，至今仍在沿用。簡化公式如下：

TVIS = n [λ/(2 × NA2) + 340 μm/(NA × MTOT VIS)]

在放大率低時，縮小光圈（即減小數(shù)值孔徑）可以顯著延長景深。一般可用孔徑光闌或共軛平面上的光闌來完成這一操作。但數(shù)值孔徑越小，橫向分辨率越低。

因此，問題在于如何根據(jù)物體結(jié)構(gòu)找到分辨率和景深之間的最佳平衡點。借助高分辨率物鏡（高NA）和可調(diào)孔徑光闌，現(xiàn)代光學(xué)顯微鏡能夠根據(jù)特定樣品的要求靈活匹配光學(xué)器件。在體視顯微鏡中，考慮到三維結(jié)構(gòu)中z維度的要求，通常需要作出一些妥協(xié)以獲得更大景深。

Leica Microsystems采用了一種復(fù)雜的光學(xué)方法來消除體視顯微鏡中分辨率和景深之間的相關(guān)性，這種方法就是FusionOptics™。該設(shè)備提供了一條光路方便觀察者單眼觀察分辨率高但景深短的圖像。另一只眼可通過第二條光路觀察到同一物體，但此時分辨率低而景深長。

人腦將兩個獨立的圖像組合成一個最佳的整體圖像，即同時具有高分辨率和長景深的特征。

還有一個示例也闡明了人腦的非凡能力，即Greenough體視顯微鏡。在這個顯微鏡中，左光路和右光路中的物體平面之間存在微小角度。在整個圖像中，整個陰影區(qū)域看起來是清晰聚焦的，但左圖像或右圖像中的并非如此。

圖2：具有景深范圍的Greenough體視顯微鏡中的物體平面

Leica應(yīng)用程序組（LAS X）的多聚焦模塊旨在多次通過多次聚焦來增加自動顯微鏡的景深。用戶可以單獨設(shè)置照明、圖像亮度和所有其他相機參數(shù)，以優(yōu)化所獲圖像的質(zhì)量。

利用LAS X多聚焦模塊，在顯微鏡和主動對焦的一體化控制下，可以輕松捕獲具有更大景深的實時圖像。z堆棧的自動捕獲以及智能圖像組合算法確保可以輕松拍攝并存儲清晰的聚焦圖像。

由于存在自動化處理例行程序，用戶幾乎無需干預(yù)。可針對各種樣品輕松更改此類設(shè)置。多聚焦模塊適用于材料科學(xué)、法醫(yī)學(xué)以及生物和地球科學(xué)方面的應(yīng)用程序。