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人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞試劑盒

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

應(yīng)用領(lǐng)域 化工    
人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞試劑盒只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿(mǎn),光澤度好,*,專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶(hù)!

詳細(xì)介紹

人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞試劑盒懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
產(chǎn)品名稱(chēng):人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞試劑盒
規(guī)格:6次/盒

貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線(xiàn) 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)
Anti-IL-1R I /FITC 熒光素標(biāo)記白介素1受體Ⅰ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-PP-2A/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)磷酸酶-2A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ARC/Arg3.1 ARC抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-Mink IgG/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗水貂IgG 0.1ml

GPR77 英文名稱(chēng): G蛋白偶聯(lián)受體77抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Mink IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格 0.5ml

Anti-PP-2A/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)磷酸酶-2A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit 人黑色素細(xì)胞抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-HIV gp120 艾滋病病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MDMX MDM2樣P53蛋白結(jié)合抗體 規(guī)格 0.2ml

PAMY(Human Pancreatic Amylase) ELISA Kit 人胰淀粉酶 96T

RNF113A 英文名稱(chēng): 環(huán)指蛋白113A抗體 0.1ml

C1orf167 英文名稱(chēng): 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框167抗體 0.2ml

Anti-HIV gp120 艾滋病病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit IgG Sepharose 4B 兔IgG親和層析柱 2ml柱床體積

TLK1 英文名稱(chēng): 調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh ODF3/CT135 /抗原135抗體 規(guī)格 0.2ml

Tetracycline/BSA 四環(huán)素偶聯(lián)血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 2mg

CDKN2AIP 英文名稱(chēng): 鈣反應(yīng)因子抗體 0.2ml

Anti-Phospho-p57 Kip2 (Thr310) 磷酸化周期蛋白依賴(lài)激酶抑制因子1C抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-ADRB3/ Beta3-AR /RBITC 羅丹明標(biāo)記腎上腺素能受體β3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-p-ERK1/p-MAPK-1/2 /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CREB-H/CREB3L3 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白H抗體 規(guī)格 0.2ml

DHT/BSA 雙氫睪酮偶聯(lián)血清白蛋白 1mg

KLK8 英文名稱(chēng): 激肽釋放酶8抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh UGP2 尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化酶2抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-p-ERK1/p-MAPK-1/2 /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

 

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