白三烯A4水解酶抑制劑（DG051）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-FoxO3a (Ser294) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠叉頭蛋白3A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-NKG2A/CD159a/KLRC1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞受體2A/自然殺傷細(xì)胞活化性受體2A抗體IgGMulti-class antibodi

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

中國(guó)漢納酵母鋅指蛋白103抗體Human POLM ELISA Kit血管緊張1-7(Ang1-7)ELISA Kit

沙福芽孢桿菌纖維母生長(zhǎng)因子7抗體Human POLR1C ELISA Kit血管緊張(ANG)ELISA Kit

大豆慢生根瘤菌肺Kruppel樣因子抗體Human POLR1A ELISA Kit血管活性肽抑制劑(VPI)ELISA Kit

希瓦氏菌*激肽釋放5抗體Human POLR2J ELISA Kit血管活性腸肽(VIP)ELISA Kit

白乳菇激肽釋放13抗體Human POLE3 ELISA Kit血管動(dòng)蛋白(AMOT)ELISA Kit

Termitomyces bulborhizus 激肽釋放15抗體Human POLG2 ELISA Kit旋毛蟲(chóng)抗體(Trichinella Ab)ELISA Kit

白假絲酵母激肽釋放2抗體Human POLI ELISA Kit溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA Kit

米根霉激肽釋放12抗體Human POLM ELISA Kit雄烯二(ASD)ELISA Kit

雞、滑液支原體（-）陰性血清G蛋白偶聯(lián)受體54抗體Human POLR1A ELISA Kit雄激受體(AR)ELISA Kit

耐冷冷桿菌驅(qū)動(dòng)蛋白家族KIF17抗體Human POLR1C ELISA Kit雄激結(jié)合蛋白(ABP)ELISA Kit

臭曲霉轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體Human POLR1D ELISA Kit胸腺依賴性抗原(TD-Ag)ELISA Kit

皮狀絲孢酵母上皮特異性蛋白1抗體Human POLR1E ELISA Kit胸腺五肽(TP-5)ELISA Kit

西藏木霉磷化離子通道蛋白Kv3.1抗體Human POLG2 ELISA Kit胸腺肽β4(Thymosin β4)ELISA Kit

科羅拉多擬無(wú)枝菌周期基因1蛋白抗體Human POLI ELISA Kit胸腺肽α1(Thymosin α1)ELISA Kit

粒狀青霉驅(qū)動(dòng)蛋白KIF5B抗體Human PNRC1 ELISA Kit胸腺肽(Thymosin)ELISA Kit

木耳kelch樣蛋白13抗體Human LTC4S(Leukotriene C4 synthase) ELISA Kit胸腺嘧啶核苷磷化(TP)ELISA Kit

不解糖假蒼白桿菌Pseudochrobactrum│asaccharolyticum 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)高三尖杉酯堿

哲拉什黃桿菌Flavobacterium│degerlachei 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)化兩面針堿

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)血根堿
白三烯A4水解酶抑制劑（DG051）CGRP  CGRP降鈣因相關(guān)肽抗體山梨 >99.0%(T)

ChAT  ChAT膽酰轉(zhuǎn)移抗體2-吡啶 98%

CHK1  周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體3-吡啶 99%

CHK2  周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體4-吡啶 98%

Phospho-CHK2 (Thr68)  化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體山梨 AR，99%

Chloramphenicol  霉抗體山梨 CP，99%

Gentamicin  慶大霉抗體山梨 分析標(biāo)準(zhǔn)品

Tetracycline  四環(huán)抗體山梨標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/mL，體：純水