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技術文章

蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測程序

閱讀:160          發(fā)布時間:2022-6-8

蛋白酶抑制劑混合物(用于培養(yǎng)基)檢測程序:


1.  加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。


2.  洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。


3.  每孔中加入第一抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。


4.  洗板:同前。


5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。


6.  洗板:同前。


7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。


8.  每孔加入100ul 終止液混勻。


9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。


結果計算與判斷


1.  所有 OD 值都應減除空白值后再行計算。


2.  以標準品4000 、 20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 0  pg /ml 為橫坐標, OD 值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。


3.  根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應 TIMP-1 含量 即可 。


試劑盒性能


   1.    靈敏度 : 最小的TIMP-1  檢測濃度小于 31p g/ml。


2.  特異性: 可同時檢測重組或天然的小鼠 TIMP-1 。 不與 小鼠其它細胞因子有交叉反應。


3.  重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。


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