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技術(shù)文章

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)elisa試劑盒樣本處理及要求

閱讀:187          發(fā)布時(shí)間:2021-9-14

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)elisa試劑盒樣本處理及要求:


1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。


3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。


4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到


100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。


6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.


7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

 

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞

rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞

RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞

RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞

rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞

 細(xì)胞名稱(chēng)

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元

MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元

mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞

CSC, 小鼠心肌細(xì)胞

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞

mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元

 細(xì)胞名稱(chēng)

人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞

人羊膜上皮細(xì)胞

人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞

人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞

人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞


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