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人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要
閱讀：148 發(fā)布時間：2020-5-14人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要：
1.實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2.加樣（標準品及樣本）50μL，37℃孵育30分鐘；
3.洗板5次，加酶標試劑50ul，37℃孵育半小時；
4.洗板5次；加入顯色液A，B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘
5.加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。
6.計算
結(jié)果判斷:
1.每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖，如設(shè)置復(fù)孔，則應(yīng)取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，繪出標準曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標，標準品的濃度為縱坐標，繪出標準曲線。
2.推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標準曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
3.若樣品OD值高于標準曲線上限，應(yīng)適當稀釋后重測，計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。