化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
小鼠鈣聯(lián)蛋白elisa試劑盒試劑配制步驟
閱讀：223 發(fā)布時(shí)間：2020-3-12小鼠鈣聯(lián)蛋白elisa試劑盒試劑配制步驟:
1、酶聯(lián)板Assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品Standard：2瓶?jī)龈善贰?br />3、樣品稀釋液Sample Diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液Biotin-antibody Diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 HRP-avidin Diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體Biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素HRP-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液TMB e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液Wash Buffer：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液Stop Solution：1×10ml/瓶2N H2SO4。
優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法測(cè)定標(biāo)本中AIF水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入AIF抗原、生物素化的抗小鼠AIF抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的AIF呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度OD值，計(jì)算樣品濃度。