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產(chǎn)品簡介
酵母質(zhì)粒小量抽提試劑盒（Yeast Plasmid Mini Preparation Kit）是一種使用破壁酶（Lyticase）消化去除酵母細(xì)胞壁，然后采用一種新型的酵母質(zhì)粒純化柱實(shí)現(xiàn)從酵母細(xì)胞中進(jìn)行小量質(zhì)?？焖俪樘岬脑噭┖?。無需酚氯抽提，無需酒精沉淀，12個(gè)樣品只需約1-1.5小時(shí)即可完成。
詳細(xì)介紹
上海雅吉的酵母質(zhì)粒小量提取試劑盒(Yeast Plasmid Mini Preparation Kit)是一種使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母細(xì)胞壁，然后采用一種新型的酵母質(zhì)粒純化柱實(shí)現(xiàn)從酵母細(xì)胞中進(jìn)行小量質(zhì)?？焖俪樘岬脑噭┖?。
無需酚氯抽提，無需酒精沉淀，12個(gè)樣品只需約1-1.5小時(shí)即可完成。
試劑盒提供了破壁酶(Lyticase)，酵母收集后，加入Lyticase消化去除細(xì)胞壁，接著采用傳統(tǒng)堿裂法裂解細(xì)胞，然后將獲得的上清液轉(zhuǎn)移至結(jié)合柱結(jié)合DNA，經(jīng)過離心快速洗滌，zui后用洗脫液洗脫出酵母質(zhì)粒DNA。
由于采用了高濃度的破壁酶，無需再使用玻璃珠，可以避免因?yàn)椴Ａе榈臋C(jī)械作用帶來的酵母基因組DNA污染。
每個(gè)質(zhì)粒純化柱可以結(jié)合的質(zhì)粒量的上限約為20微克。質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量依賴于酵母攜帶質(zhì)粒的拷貝數(shù)，酵母菌株以及生長條件。通常酵母質(zhì)粒的拷貝數(shù)較低，1.5-5ml培養(yǎng)過夜的酵母抽提獲得的質(zhì)粒DNA量約為1-3微克左右。高拷貝酵母質(zhì)粒抽提時(shí)的得率會(huì)大大提高。抽提所得質(zhì)粒的量與酵母培養(yǎng)濃度、質(zhì)?？截悢?shù)、酵母品系等因素有關(guān)。
使用酵母質(zhì)粒小量抽提試劑盒抽提得到的酵母質(zhì)粒DNA可用于各種常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，如轉(zhuǎn)化、PCR、基于PCR的突變、體外轉(zhuǎn)錄、酶切、測序、文庫篩選等。
產(chǎn)品清單
保存條件：
D0029-8需-20℃保存，其余室溫保存，一年有效。D0029-8為粉末，短時(shí)間4℃存放不影響其活性。D0029-8配制成Lyticase溶液后4℃可以保存1個(gè)月，-20℃可以保存6個(gè)月。
注意事項(xiàng)：
*次使用前把試劑盒提供的RNase A全部加到溶液Ⅰ(懸浮液)中，混勻，并在瓶上做好標(biāo)記。加入RNase A后4℃存放。
*次使用前在每瓶溶液Ⅳ(洗滌液)中加入27ml無水乙醇，混勻，并在瓶上做好標(biāo)記。
*次使用前吸取1ml Lyticase配制液到Lyticase粉末中，*溶解后即為Lyticase溶液。配制好的Lyticase溶液4℃可以保存1個(gè)月，-20℃可以保存6個(gè)月。如需-20℃保存，zui能適當(dāng)分裝。Lyticase溶液配制后或凍存后再溶解可能會(huì)出現(xiàn)輕微混濁，屬正常現(xiàn)象，請混勻后使用。
溫度較低時(shí)，溶液Ⅱ和溶液Ⅲ可能會(huì)有沉淀產(chǎn)生。使用前必須檢查一遍。如有沉淀，37℃水浴加熱溶解，混勻后使用。溶液Ⅱ請勿過分劇烈混勻，否則會(huì)產(chǎn)生大量氣泡。
溶液Ⅱ使用完后，一定要蓋緊瓶蓋，防止被空氣中二氧化碳酸化。
溶液II有強(qiáng)堿性，溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和Lyticase對人體有刺激性，操作時(shí)請小心，并注意適當(dāng)防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
酵母質(zhì)粒小量抽提試劑盒所有操作均在室溫進(jìn)行，操作時(shí)無需冰浴。所有離心也均在室溫進(jìn)行。
廢液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丟棄。
*于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。