詳細(xì)介紹
1.產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠肌源性干細(xì)胞
2.組織來(lái)源:肌肉組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠肌源性干細(xì)胞分離自肌肉組織;肌源性干細(xì)胞(MDSCs)屬于成體多能干細(xì)胞,具有多細(xì)胞系分化和自我更新能力。通過(guò)誘導(dǎo)刺激,MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞和組織類(lèi)型;作為基因治療和組織工程的供體細(xì)胞,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營(yíng)養(yǎng)不良等疾病的研究熱點(diǎn);近年來(lái),肌源性干細(xì)胞在治療尿失禁等方面的應(yīng)用逐步得到重視。需注意的是,肌源性干細(xì)胞主要存在于骨骼肌組織中,只是成熟組織的很少部分細(xì)胞;平時(shí)處于靜止?fàn)顟B(tài),在細(xì)胞應(yīng)激和組織缺失時(shí)才會(huì)激活;并且隨著年齡的增加,所含細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,而目前臨床疾病的治療主要是針對(duì)成體進(jìn)行。肌源性干細(xì)胞的體外擴(kuò)增對(duì)細(xì)胞移植和干細(xì)胞介導(dǎo)的基因治療至關(guān)重要。對(duì)肌源性干細(xì)胞的擴(kuò)增研究發(fā)現(xiàn),EGF、FGF-2和SCF可以通過(guò)減數(shù)分裂或促使不分裂細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂周期,從而刺激細(xì)胞增生。更重要的是,細(xì)胞因子誘導(dǎo)的體外擴(kuò)增可以通過(guò)自我更新不刺激細(xì)胞分化,從而保持干細(xì)胞表型。
本公司生產(chǎn)的采用膠原酶-中性蛋白酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法,后通過(guò)肌源性干細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)CD34、Desmin、CD45免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H]、FBS、HS、Chicken Embryo Extract(CEE)、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):CM-R166)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4.顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5.①若細(xì)胞密度較小,無(wú)菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。
②若細(xì)胞密度較大,達(dá)到80%以上,將細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀(guān)察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對(duì)原來(lái)*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來(lái)FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系并提供圖片,以便售后處理。7天內(nèi)反饋,細(xì)胞本身問(wèn)題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費(fèi)售后