小鼠腦靜脈血管內皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合密度梯度離心法、差速貼壁法，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為T25瓶；細胞經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1.產品名稱：小鼠腦靜脈血管內皮細胞
2.組織來源：腦靜脈組織
3.產品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠腦靜脈血管內皮細胞分離自腦靜脈組織；與腦動脈相比，腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同，腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣，靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為：大部腦靜脈血經腦深部靜脈和腦血竇流入頸內靜脈醫(yī)|學教育網搜集整理；小部腦靜脈血經眼部翼狀靜脈叢，進入靜脈導血管再到頭皮，后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢，即使兩側頸內靜脈都被阻塞，大腦靜脈血仍可經椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈血管內皮細胞的主要功能是維持血管內外的動態(tài)平衡，合成和分泌細胞因子和介質參與免疫反應，維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
本公司生產的采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS、內皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產品貨號：CM-M102）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

三、使用方法
在技術部標準操作流程下，小鼠肺微血管內皮細胞可傳3-5代；建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待
細胞回縮變圓后，再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和
技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時
和我們，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研。

備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考