詳細介紹
1.產(chǎn)品名稱:小鼠腮腺細胞
2.組織來源:腮腺組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
小鼠腮腺細胞分離自腮腺組織;腮腺是哺乳類動物口腔中位于下頜角處的大唾液腺,位于外耳道的前下方,下頜后窩內(nèi)及下頜支的深面。腮腺也是某些無尾目動物頸部有毒皮膚腺的聚集體;唾液腺有3對,腮腺、舌下腺和頜下腺,其中大的一對是腮腺。腮腺細胞是高度分化的上皮源性細胞,是一種營養(yǎng)需要復(fù)雜、在一般合成培養(yǎng)基中不易生長,體外培養(yǎng)比較困難。目前,DMEM培養(yǎng)液被認為較適于腺細胞的培養(yǎng)。加入一定量的血清更有利于細胞的生長、增殖與分化。另外,接種的細胞密度也是培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素之一,尤其是在腺細胞這種單層細胞培養(yǎng)時,接種的細胞總數(shù)量和生長基質(zhì)表面的細胞密度對整個細胞的生長均有影響。
本公司生產(chǎn)的采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化后差速貼壁,結(jié)合上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經(jīng)PCK免疫熒光和α-淀粉酶檢測鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H]、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:CM-M019)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
三、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞可傳3-5代;建議您收到
細胞后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培
養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待
細胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*
培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和
技術(shù)部溝通;由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時
和我們,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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