詳細(xì)介紹
大鼠鈣離子(Calcium)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠鈣離子(Calcium)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過(guò)氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠鈣離子(Calcium)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過(guò)夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過(guò)夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開(kāi)始),100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽(yáng)性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。
大鼠鈣離子(Calcium)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
2410 人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2420 人毛囊外根鞘細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2430 人毛囊內(nèi)根鞘細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2440 人毛囊角質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2500 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2530 人淋巴成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2540 人淋巴單核細(xì)胞 10 million cells in 1 ml volume
3910 人胸腺上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3930 人胸腺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2540 人淋巴單核細(xì)胞 10 million cells in 1 ml volume
2560 人扁桃體上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2570 人扁桃體成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2550 人扁桃體內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2610 人口腔角質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2620 人牙齦成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2630 人牙周膜成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2640 人口腔成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2700 人食道微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2710 人食道平滑肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2720 人食管上皮細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2730 人食管成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
2810 人胃平滑肌細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2900 人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2910 人腸平滑肌細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2920 人腸道成纖維細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2930 人結(jié)腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2940 人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2950 人結(jié)腸上皮細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2960 人直腸成纖維細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2970 人直腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2980 人直腸平滑肌細(xì)胞 5x10^5cells/vial
2830 人胃成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3000 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5x10^5cells/vial
3100 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5x10^5cells/vial
3110 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5x10^5cells/vial
3120 人肺動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 5x10^5cells/vial
3200 人肺泡上皮細(xì)胞 1 x 10^6 cells/vial
3210 人支氣管上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3220 人氣管上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3230 人小氣道上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3300 人肺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3310 人肺成纖維細(xì)胞-成人 5 x 10^5 cells/vial
3400 人支氣管平滑肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3410 人氣管平滑肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3420 人支氣管成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3430 人氣管成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
7540 人肺間充質(zhì)干細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3500 人骨骼肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3510 人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3520 人骨骼肌成肌細(xì)胞 5x10^5cells/vial
3600 人腎上腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3610 人腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3630 人腎上腺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3830 人胰腺星狀細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3730 人甲狀腺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
3730 人甲狀腺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4000 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4100 人腎小管上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4110 人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4120 人腎臟上皮細(xì)胞HREpiC 5 x 10^5 cells/vial
4200 人腎系膜細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4300 人膀胱微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4310 人膀胱平滑肌細(xì)胞 5x10^5cells/vial
4320 人尿道上皮細(xì)胞 5x10^5cells/vial
4330 人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4400 人前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4410 人前列腺上皮細(xì)胞 5x10^5cells/vial
4430 人前列腺成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4450 人精囊微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4460 人精囊上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4470 人精囊成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4500 人睪丸血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4510 人睪丸間質(zhì)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4520 人睪丸支持細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4600 人顱骨成骨細(xì)胞 5x10^5cells/vial
4610 人股骨成骨細(xì)胞 5x10^5cells/vial
4650 人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞 5x10^5cells/vial
4700 人滑膜細(xì)胞 5x10^5cells/vial
4800 人髓核細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
4810 人脊髓纖維環(huán)細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
5000 人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
5100 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
5200 人肝細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
5300 人肝星形細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
5050 人肝單核細(xì)胞HLMC 1 x 10^6 cells/vial
5340 人肝巨噬細(xì)胞 1 x 10^6 cells/vial
5430 人膽囊成纖維細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
5500 人脾血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
5530 人脾成纖維細(xì)胞 5x10^5cells/vial
6000 人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
6020 人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
6100 人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial
6110 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 5 x 10^5 cells/vial