詳細(xì)介紹
大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價。
相關(guān)產(chǎn)品如下:
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YS07768B 小鼠血液硫代巴比妥酸反應(yīng)物(TBARS)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07769B 小鼠胰島素(Insulin)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07775B 小鼠粘蛋白粘液素5AC(MUC5AC)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07776B 小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTESCCL5)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07778B 小鼠脂褐素(Lipo)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07782B 鴨甲肝病毒3型(DHAV-3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07784B 鴨瘟(DVE)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒定性
YS07785B 鴨細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07786B 鴨誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07787B 羊布氏桿菌抗體(Brucella-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07788B 羊產(chǎn)氣莢膜梭菌B型抗體(CPB)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07790B 羊傳染性胸膜肺炎(pleuropneumonia)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07791B 羊膽囊收縮素(CCK)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07792B 羊肺炎支原體抗體(MPAb)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07793B 羊甘丙肽(GAL)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07794B 羊谷氨酸脫羧酶(GAD)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07795B 羊苦馬豆素(Swainonine)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07796B 羊藍(lán)舌病毒抗體(BLU)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07797B 羊鏈球菌抗體(strep-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07798B 羊胃抑肽(GIP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07799B 羊小反芻獸疫(PPR)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07800B 羊小反芻獸疫抗體(PPR-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07801B 魚補(bǔ)體3(C3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07802B 魚超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07803B 魚雌激素(E)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07804B 魚促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07805B 魚多巴胺(DA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07806B 魚高鐵血紅蛋白(MHB)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07807B 魚果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07808B 魚華支睪吸蟲抗體(Cs-Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07809B 魚激素敏感脂肪酶(HSL)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07810B 魚類上腺素(EPI)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07811B 魚磷酸果糖激酶(PFK)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07812B 魚去甲腎上腺素(NE)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07813B 魚溶菌酶(LYS)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07814B 魚雄激素(androgen)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07815B 魚異檸檬酸脫氫酶(ICD)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07816B 魚硬脂酰輔酶A去飽和酶(SCD)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07817B 魚總蛋白酶(t-Pro)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07818B 植物ATP合成酶(ATPsynthase)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07819B 植物L(fēng)苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07820B 植物NADH脫氫酶(ND)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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YS07822B 植物半纖維素(hemicellulose)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
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