詳細介紹
大鼠17-酮類固醇(17-KS)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠17-酮類固醇(17-KS)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠17-酮類固醇(17-KS)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價。
大鼠17-酮類固醇(17-KS)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS02402B 人高鐵血紅蛋白(MHB)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02403B 人低分子肝素(LMWH)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02404B 人補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02405B 人補體片段3b受體(C3bR)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02406B 人補體1抑制物抗體(C1INH)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02407B 人B因子(BF)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02408B 人類白細胞抗原G(HLA-G)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02409B 人補體片斷3b(C3b)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02410B 人補體片斷4b(C4b)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02411B 人補體片斷5b(C5b)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02412B 人免疫球蛋白重鏈(IgH)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02413B 人免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02414B 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02415B 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02416B 人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02417B 人免疫球蛋白j鏈(Ig-j)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02418B 人血紅蛋白β亞基(HB-β)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02419B 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02420B 人活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02421B 人游離蛋白S(FP-S)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02422B 人異常凝血酶原(APT)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02423B 人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02424B 人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02425B 人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02426B 人纖溶酶原(Plg)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02427B 人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02428B 人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02429B 人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02430B 人皮膚淋巴細胞相關(guān)抗原(CLA)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02431B 人凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02432B 人溶血補體(Hc)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02433B 人T細胞受體(TCR)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02434B 人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02435B 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02436B 人血清白蛋白(HSA)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02437B 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02438B 人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02439B 人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02440B 人纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02441B 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02442B 人血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02443B 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02444B 人末端補體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02445B 人補體蛋白4(C4)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02446B 人補體蛋白3(C3)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02447B 人凝血因子Ⅱ(FⅡ)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02448B 人類白細胞抗原B27(HLA-B27)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02449B 人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02450B 人血清總補體(CH50)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02451B 人過敏毒素/補體片斷4(C4a)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02452B 人補體片斷5a(C5a)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02453B 人補體片斷3a(C3a)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02454B 人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02455B 人凝血因子Ⅸ(FⅨ)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02456B 人凝血因子Ⅹ(FⅩ)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02457B 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02458B 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02459B 人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02460B 人抗凝血酶受體(ATR)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02461B 人凝血酶受體(TR)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02462B 人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02463B 人血纖蛋白原(Fbg)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02464B 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02465B 人抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02466B 人血栓前體蛋白(TpP)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02467B 人淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02468B 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02469B 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02470B 人載脂蛋白A1(apo-A1)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02471B 人載脂蛋白B100(apo-B100)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02472B 人白血病抑制因子受體(LIFR)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒
YS02473B 人免疫球蛋白A(IgA)酶聯(lián)免疫吸附試劑盒