人膠原蛋白Ⅱ（HCBⅡ）Elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法（Sandwich ELISA）檢測(cè)樣品中靶蛋白的的濃度，其原理見圖2。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上，當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí)，其中的靶蛋白會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入生物素化的抗靶蛋白抗體后，生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合，形成夾心的免疫復(fù)合物

人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)Elisa試劑盒WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。
      WST-1是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的
formazan(參考圖1)。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。

圖1. WST-1檢測(cè)原理圖 (EC=electron coupling reagent，即電子耦合試劑)

      人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)Elisa試劑盒是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先，MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來(lái)溶解；而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-1產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-1比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。另外，WST-1和MTT、XTT等相比，線性范圍更寬，靈敏度更高(參考圖2)。

圖2. WST-1、XTT和MTT的檢測(cè)效果比較 注：450nm為測(cè)定波長(zhǎng)，690nm為參考波長(zhǎng)

      本試劑盒可以用于細(xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測(cè)，也可以用于抗癌藥物等對(duì)細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測(cè)，或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè)等。
      人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)Elisa試劑盒檢測(cè)非常便捷。無(wú)須使用同位素，所有的檢測(cè)步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞，不必收集細(xì)胞，也不必采用額外步驟去溶解formazan?？梢杂糜诖笈繕悠返臋z測(cè)。
      酚紅和血清對(duì)本試劑盒的測(cè)定無(wú)明顯影響。
      WST-1對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。加入WST-1顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板，使檢測(cè)時(shí)間更加靈活，便于找到*測(cè)定時(shí)間。
      
      本試劑盒可以測(cè)定100個(gè)樣品。
包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
C0035-1	WST-1(粉末)	1管
C0035-2	電子耦合試劑	1ml
—	說(shuō)明書	1份

保存條件：
      -20℃避光保存，一年有效。WST-1粉末溶解后，4℃避光可以保存一周，-20℃避光可以保存半年(宜適當(dāng)分裝，盡量避免反復(fù)凍融)。
注意事項(xiàng)：
      由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈zui容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。
      人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)Elisa試劑盒僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。