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如何鑒定子癇前期大鼠胎盤模型中的自然殺傷細胞
閱讀：195 發(fā)布時間：2018-10-171、介紹
多年來，大鼠已經(jīng)成為了學術界和產(chǎn)業(yè)界廣泛采用的重要臨床前動物模型系統(tǒng)。使用大鼠進行研究的一個重要方面就是生殖。子癇前期是一種會對大多數(shù)懷孕造成影響的疾病，它是一種因孕婦出現(xiàn)高血壓而引起的并發(fā)癥。子癇前期通常與慢性炎癥相關，而且還會危及孕婦和胎兒的生命。選用妊娠大鼠模型來研究胎盤的免疫反應，有助于我們了解子癇前期，而我們研究的終目的是研發(fā)出一種治療方法，以完善這種嚴重疾病的發(fā)病機制。在本文中，我們對大鼠胎盤中存在的自然殺傷細胞進行了表征。
2、材料與方法
采用無痛致死術將大鼠于妊娠 19 天處死，并摘取胎盤。從胎盤中獲取單細胞懸液。4℃ 孵育細胞 30 分鐘，添加或不添加抗體，以自然殺傷細胞標記物 ANK61 抗體進行標記。隨后，400 g 離心 5 分鐘，將上述兩種情況下得到的細胞洗滌 3 次，并將其放在 4℃ 避光條件下，用二抗 5-FITC 孵育 30 分鐘。后，將這些細胞洗滌 3 次，并重懸于含有 50% 福爾馬林的 RPMI 中。使用 CytoFLEX* 流式細胞儀對這些細胞進行分析。分析結(jié)果顯示，陽性染色細胞的百分比大于陰性對照組。
3、試劑
ANK61 小鼠抗大鼠單克隆純化抗體 / Abcamab36392。
山羊抗小鼠 FITC / Abcam ab6785。
4、數(shù)據(jù)分析
FSC-A x SSC-A 活性設門
圖 1. 山羊抗小鼠二抗 FITC（藍色）與 ANK61 小鼠抗大鼠一抗山羊抗小鼠 二抗 FITC（綠色）的疊加直方圖。
5、結(jié)果
本文利用 CytoFLEX 流式細胞儀展示大鼠胎盤中被激活 NK 細胞出現(xiàn)增長的現(xiàn)象，促使我們能夠進一步對胎盤中的免疫反應進行表征，從而進一步實現(xiàn)了了解子癇前期病理生理學機制的終目的。
6、參考文獻
Amaral LM, Cunningham Jr MW, Cornelius DC, LaMarca B. Preeclampsia: long term consequences for vascular health.Vasc Health Risk Manag.2015 in press.
*本產(chǎn)品僅用于科研，不用于臨床診斷。
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