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一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞說(shuō)明書(shū)

1、產(chǎn)品名稱：大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞

2、組織來(lái)源：大鼠骨骼肌

3、產(chǎn)品規(guī)格：5×105 細(xì)胞/25cm2 培養(yǎng)瓶

4、細(xì)胞簡(jiǎn)介： 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維（肌細(xì)胞）外的一種扁平、有突起的細(xì)胞。其

附著于肌纖維

（肌細(xì)胞）表面；當(dāng)肌纖維（肌細(xì)胞）受損后，肌衛(wèi)星細(xì)胞可增殖分化，參與肌纖維（肌細(xì)胞）的修復(fù)，

因此具有干細(xì)胞性質(zhì)。

本公司生產(chǎn)的大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞采用酶解法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105/T25 方瓶，細(xì)胞純度可

達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基信息：

我們推薦使用大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞*培養(yǎng)液（產(chǎn)品編號(hào)：KR5083-5）作為體外培養(yǎng)大鼠骨骼肌衛(wèi)星

細(xì)胞的培養(yǎng)基。

二、使用方法

1、您收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6

小時(shí)或過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代：

1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS 清洗細(xì)胞一次；

2）添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入*

培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml 離心管中，1500rpm/min，離心

5min；

3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml *培養(yǎng)基重懸，然后按1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代，后放入37℃，

5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）待細(xì)胞*貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存：

1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS 清洗細(xì)胞一次；

2）添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打

細(xì)胞使之脫落，再加入*培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml 離心管中，1500rpm/min，離心

5min；

3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；

4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過(guò)夜，24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇：

1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存

管中無(wú)結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；

2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml 無(wú)菌離心管中，滴加入*培養(yǎng)液5ml 混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)

移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；

3）放置于37℃，5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）第二天，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

三、注意事項(xiàng)

1、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6 個(gè)月；

2、在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作；

3、該細(xì)胞只可用于科研；