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植物組培胚胎培養(yǎng)
閱讀：810 發(fā)布時(shí)間：2021-1-22胚及胚器官（如子房、胚珠）在離體無(wú)菌條件下，使胚發(fā)育成幼苗的技術(shù)。包括幼胚培養(yǎng)、成熟胚培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)等。
胚胎培養(yǎng)史：已有近百年，1904年的Haning*培養(yǎng)了蘿卜和辣椒的胚，并萌發(fā)形成小苗。30年代把蘭科植物的胚培養(yǎng)成小植株。40年代進(jìn)行蘋(píng)果、桃、柑桔、梨、葡萄、山楂、馬鈴薯、甘藍(lán)與大白菜的種間雜，種的胚胎培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)及子房與胚珠培養(yǎng)。
（一）胚胎培養(yǎng)的意義
１．克服遠(yuǎn)緣種的不育性 用胚胎培養(yǎng)和試管受精技術(shù)，解決種間和屬間胚敗育，胚發(fā)育不全，而不能正常萌發(fā)的問(wèn)題。
２．使胚發(fā)育不全的植物獲得后代。如蘭花、天麻的種子成熟時(shí)，胚只有6～7個(gè)細(xì)胞，多數(shù)胚不能成活。分離出這此些未成熟胚進(jìn)行培養(yǎng)，得到正常植物。
３．縮短育種年限 應(yīng)用胚培養(yǎng)技術(shù)可以縮短育種周期1～2年。
（二）離體胚培養(yǎng)
胚發(fā)育過(guò)程：受精→受精卵→合子→第，一次分裂→分生組織和幼胚→成熟胚。在這個(gè)過(guò)程，胚靠消耗胚乳的營(yíng)養(yǎng)而發(fā)育，同時(shí)胚處在胚囊環(huán)境中，可吸收氨基酸、維生素等營(yíng)養(yǎng)。
離體胚培養(yǎng)包括成熟胚和幼胚培養(yǎng)。
１．成熟胚培養(yǎng) 指子葉期后至發(fā)育*的胚。
培養(yǎng)較易成功，在含有無(wú)機(jī)大量元素和糖的培養(yǎng)基上，就能正常生長(zhǎng)成幼苗。將成熟或未成熟種子→70%酒精表面消毒→無(wú)菌水沖洗3～4次→無(wú)菌條件下進(jìn)行解剖，取出胚并接種在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)上培養(yǎng)。
２．幼胚培養(yǎng) 幼胚是指子葉期以前的幼小胚，現(xiàn)在可對(duì)心形期胚或更早期(0.1～0.2mm)的胚進(jìn)行培養(yǎng)。
胚越小就越難培養(yǎng)，現(xiàn)在大麥、薺菜、甘蔗、甜菜、胡蘿卜等幼胚已培養(yǎng)成功。
I)操作方法：與成熟胚培養(yǎng)基本相同，切取幼胚必須在高倍解剖鏡下進(jìn)行，操作時(shí)要特別細(xì)心，盡量取出完整的胚。
II)培養(yǎng)方式：常見(jiàn)有三種明顯不同的生長(zhǎng)方式：
第，一種是繼續(xù)進(jìn)行正常的胚胎發(fā)育，維持“胚性生長(zhǎng)”；
第，一種是在培養(yǎng)后迅速萌發(fā)成幼苗，而不繼續(xù)進(jìn)行胚性生長(zhǎng)，通常稱為“早熟萌發(fā)”；第三種是發(fā)生細(xì)胞增殖形成愈傷組織，并由此再分化形成多個(gè)胚狀體或芽原基。特別是加有生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑時(shí)，就更為如此。
III)影響因素：包括提供幼胚所必需的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件。影響條件如下：
1.培養(yǎng)基 成熟胚對(duì)培養(yǎng)基要求不高，而幼胚要求較高，常用的培養(yǎng)基有Tukey、MS、B5、Nitsch培養(yǎng)基，其中前者適于成熟胚培養(yǎng)，其它適于未成熟胚和幼胚培養(yǎng)。
幼胚需要較高的蔗糖濃度，提供較高的滲透壓。由于幼胚在自然條件下賴以生存的是無(wú)定形的液體胚乳，具有較高的滲透壓，人工培養(yǎng)基中要?jiǎng)?chuàng)造高滲透壓的條件，它可以調(diào)節(jié)胚的生長(zhǎng)，阻止可能的滲透壓影響，還能抑制中早熟萌發(fā)中的細(xì)胞延長(zhǎng)，以及抑制胚的萌發(fā)，避免把細(xì)胞的伸長(zhǎng)狀態(tài)轉(zhuǎn)化為分裂狀態(tài)。
2.生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì) 不同植物的胚培養(yǎng)需要的生長(zhǎng)物質(zhì)不同，如IAA可明顯促進(jìn)向日葵胚的生長(zhǎng)。IAA,Kt的共同作用可促進(jìn)薺菜幼胚的生長(zhǎng)。一般認(rèn)為IAA可使胚的長(zhǎng)度增加；加入BA可提高胚的生存機(jī)會(huì)。
3.天然提取物
椰乳對(duì)胚培養(yǎng)有一定的促進(jìn)作用，如番茄胚在含有50%椰乳的培養(yǎng)基中可維持生長(zhǎng)。
瓜類(lèi)的胚乳提取物也能促進(jìn)胚生長(zhǎng)的能力，可能是植物激素的細(xì)胞分裂物質(zhì)和一些有機(jī)氮化合物作用的結(jié)果。
4.溫光條件 大多數(shù)植物的胚在25～30℃為宜，但是，早熟果樹(shù)(如桃)必須經(jīng)過(guò)一定的低溫春化階段才能正常萌發(fā)生長(zhǎng)。
光照可以促進(jìn)某些植物的胚轉(zhuǎn)綠，利于胚芽生長(zhǎng)，而黑暗利于胚根生長(zhǎng)。因此以光暗交替培養(yǎng)較為有利。
5.其它條件 胚培養(yǎng)中還要求較高濃度的氨基酸及無(wú)機(jī)鹽。