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標(biāo)本中大多數(shù)神經(jīng)激素、肽類物質(zhì),以及蛋白質(zhì)為水溶性，在用于研究之前，常需固定, 即使其凝固以降低其水溶性。甲醛能與蛋白質(zhì)的氨基反應(yīng)，使蛋白質(zhì)凝固，因此在醫(yī)藥上可做為檢驗(yàn)時(shí)的組織固定劑、以及防腐劑等。在固定劑中，用的是多聚甲醛。 

常用固定液：固定劑品種很多，但大多屬于醛類和醇類。其固定原理不同，各有優(yōu)缺點(diǎn)。    
醛類（常用甲醛、戊二醛和多聚甲醛）  
醇類（常用乙醇）    
其它 （丙酮）
(1)  醛類 

甲醛（福爾馬林）應(yīng)用廣

原理：形成分子間的交聯(lián)，影響蛋白構(gòu)型而使之固定。    優(yōu)點(diǎn)：形態(tài)結(jié)構(gòu)保存好，且穿透性強(qiáng)，組織收縮少。    缺點(diǎn)： 

甲醛放置過久可氧化為甲酸，使溶液pH降低，影響染色； 

醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙； 

分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或*掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露?？稍斐杉訇幮缘娜旧Y(jié)果。     注意事項(xiàng)： 

縮短固定時(shí)間，降低固定溫度(4°C)，為此組織塊不宜過厚。
改用中性緩沖福爾馬林，以pH值7.2～7.4 0.01mol/L的磷酸鹽緩沖液配制成10％甲醛固定液，減少固定液pH的變化。 

固定后充分水洗以減少分子間交聯(lián)。 

切片在作免疫組化染色前，先經(jīng)預(yù)處理使抗原再現(xiàn)(抗原修復(fù))。 

戊二醛： 

穿透性強(qiáng)，微細(xì)結(jié)構(gòu)保存好，但對(duì)抗原有一定影響，常與其他固定劑聯(lián)合用作免疫電鏡固定液。 

多聚甲醛(常用4%)： 

可用于免疫電鏡；也可用于免疫熒光染色。 

主要檢測(cè)組織內(nèi)一些性能嬌弱的抗原特別是細(xì)胞表面抗原，例如各類淋巴細(xì)胸分化決定簇(CD)、主要組織相容性抗原等。
(2)  醇類 

用的醇類固定劑是乙醇。 

其固定作用：使細(xì)胞內(nèi)蛋白、糖類發(fā)生沉淀。   優(yōu)點(diǎn)：穿透性強(qiáng)、抗原性保存好。   缺點(diǎn)： 

脫水性強(qiáng)，易引起組織收縮、變硬，影響切片質(zhì)量，因而乙醇固定時(shí)間不宜過長(zhǎng)(2h內(nèi))。 乙醇使蛋白變性的作用輕，固定后可再溶解；染色過程中，溫育時(shí)間長(zhǎng)，抗原可流失而減弱反應(yīng)強(qiáng)度 

3)  其它固定劑 丙酮： 

對(duì)抗原性的保存好，但脫水性更強(qiáng)，較少用于組織標(biāo)本，但細(xì)胞爬片常用丙酮固定。