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尿酸（Uric Acid, UA）含量測(cè)定試劑盒說明書

可見分光光度法

注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

UA 是鳥類和爬行類動(dòng)物的主要代謝產(chǎn)物，正常人體尿液中產(chǎn)物主要為尿素，含少量尿酸。此外，UA 還是重要的抗氧化劑，能清除超氧化物，羥自由基等。體內(nèi) UA 生成量和排泄量不平衡會(huì)導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。例如，血中 UA 升高會(huì)引起痛風(fēng)、腎功能損害和動(dòng)脈硬化，相反 UA 降低會(huì)引起惡性貧血，在臨床診斷上具有重要的意義。

測(cè)定原理

尿酸酶能催化 UA 生成尿囊素，CO₂ 及H₂O₂ ，H₂O₂ 氧化亞鐵化鉀中的Fe²⁺生成Fe³⁺，F(xiàn)e³⁺進(jìn)一步與酚和4-氨基安替比林縮合生成紅色醌類化合物，在505nm下有特征吸收峰，測(cè)定反應(yīng)體系505nm 的吸收值，可計(jì)算尿酸的含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

緩沖液：液體 15mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：

A. 用于標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管，粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 10mL 緩沖液溶解。

B. 用于空白管，粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 5mL 緩沖液溶解。

試劑二：粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 10mL 雙蒸水水置于 60℃加熱溶解。

測(cè)定操作表

	標(biāo)準(zhǔn)管	空白管	測(cè)定管
試劑一（μL）	A, 200	B, 200	A, 200
H2O（μL）	600	800	600
試劑二（μL）	200
樣品（μL）			200
混勻，37℃水浴 30min，于 1mL 玻璃比色皿，空白管調(diào)零，分別測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管 A505 。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

UA 含量計(jì)算公式

尿酸（μmol/L）=A₅₀₅測(cè)定管÷A₅₀₅標(biāo)準(zhǔn)管×C 標(biāo)=A₅₀₅測(cè)定管÷A₅₀₅標(biāo)準(zhǔn)管×500

A₅₀₅測(cè)定管：測(cè)定管吸光值；A₅₀₅標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管吸光值；C標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)品濃度500μmol/L

注意事項(xiàng)

1. 血清樣本請(qǐng)?jiān)?4小時(shí)內(nèi)測(cè)定，或者4℃密封避光保存不超過72小時(shí)。

2. 吸光值大于0.8可用蒸餾水稀釋樣本，并在計(jì)算公式中算入稀釋倍數(shù)。

3. 低檢出限為10μmol/L。