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技術(shù)文章

ELISA試劑盒如何做好標(biāo)準(zhǔn)曲線

閱讀:1249          發(fā)布時(shí)間:2018-10-24

 若要給美好人生一個(gè)定義,那就是愜意。若要給愜意一個(gè)定義,那就是三五知己、談笑風(fēng)生。若要給上海雅吉生物公司一個(gè)定義,那就是科研朋友們的買ELISA試劑盒的*。

  周老師是蘇州大學(xué)在校研究生,老師在我司買了相應(yīng)的抗體自己包被ELISA試劑盒。也是剛剛接觸ELISA實(shí)驗(yàn)的新手,研究大鼠白介素相關(guān)指標(biāo)的實(shí)驗(yàn),做完大鼠白介素5ELISA實(shí)驗(yàn)后反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的梯度都不好。剛加完顯色劑的時(shí)候梯度還算明顯,但是顯色比較淺,隨著時(shí)間延長(zhǎng)(大概6、7分鐘)以后梯度就不明顯了。終止反應(yīng)后測(cè)得的值梯度就沒(méi)有了。特咨詢我司技術(shù)幫忙分析原因所在。我司技術(shù)分析:

1、剛加完顯色劑時(shí)梯度明顯:顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。
2、酶濃度太高,導(dǎo)致后顯色結(jié)果都是高的
3、包被-酶標(biāo)系統(tǒng)不匹配或者酶標(biāo)的非特異反應(yīng)太強(qiáng),或者酶標(biāo)儀讀數(shù)范圍不夠,
4、樣本中有能夠催化底物的物質(zhì),沒(méi)洗下來(lái)。
5、建議:包被、酶標(biāo)重新做梯度,先用較低的濃度把梯度摸索好,然后再優(yōu)化靈敏度,后調(diào)出所需的靈敏度、線性范圍

6、有條件的話,可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學(xué)發(fā)光上,加完底物三分鐘讀數(shù)。

7、蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了。
8、酶是自己標(biāo)的這種情況的,HRP比例不要太高。
  上海雅吉生物一直秉著以質(zhì)量求生存,以信譽(yù)求發(fā)展的精神,精益求精,力求做到更好。全體員工孜孜不倦為國(guó)內(nèi)科研事業(yè)單位以及高校等提供的產(chǎn)品服務(wù)!本公司ELISA試劑盒具有質(zhì)量可靠,靈敏度好,更具有免費(fèi)代測(cè)及技術(shù)指導(dǎo)服務(wù),歡迎科研者來(lái)電詳詢!

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