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技術(shù)文章

分光光度計(jì)測(cè)DNA含量的protocol

閱讀:360          發(fā)布時(shí)間:2018-9-19

打開(kāi)機(jī)器等待加熱
在使用前*清洗玻璃試管,如果使用2,則確保它們是一對(duì)“配對(duì)”。
在Dave Andersons灣,然后按Goto?‘260’壓入’機(jī)器將改變波長(zhǎng)。將1ml水插入機(jī)器中,按“自動(dòng)歸零”,然后將波長(zhǎng)設(shè)置為260,用水自動(dòng)調(diào)零。
放5M L的DNA濃度?放入一個(gè)干凈的匹配試管中,加入1ml水,并用覆蓋物和倒置物混合。
將試管插入機(jī)器并記錄讀數(shù),即0.030。
再次執(zhí)行步驟3,但這次將波長(zhǎng)設(shè)置為280,注意閱讀。
重復(fù)程序3次,用新的DNA樣本記錄A260和A280的讀數(shù)。
取A260讀數(shù)的平均值,將數(shù)字乘以10,得到每毫升DNA的濃度,即0.030x 10=3.0mg/ml。
取A280讀數(shù)的平均值,將A260平均值除以A280平均值,如果該值超出范圍,則應(yīng)給出1.8-2.0之間的數(shù)字,然后DNA不純,樣品應(yīng)使用苯酚/氯純化。

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