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武漢艾美捷科技有限公司
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乙醇測定試劑盒,操作簡便、結(jié)果可靠

時(shí)間:2025/4/9閱讀:83
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乙醇在人體內(nèi)參與多種代謝途徑。攝入后,乙醇主要在肝臟通過氧化代謝進(jìn)行代謝,涉及乙醇脫氫酶和乙醛脫氫酶,將乙醇轉(zhuǎn)化為有毒的乙醛,再進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為乙酸,最終生成二氧化碳和水。乙醇代謝影響能量平衡和營養(yǎng)物質(zhì)的利用。乙醇的代謝優(yōu)先于其他宏量營養(yǎng)素,導(dǎo)致過量的碳水化合物和脂肪儲存。長期飲酒會破壞代謝途徑,影響肝臟功能、脂質(zhì)代謝和血糖調(diào)節(jié)。AkrivisBio的乙醇檢測試劑盒提供了一種簡單、靈敏的乙醇測量方法,適用于多種樣本。在檢測中,乙醇氧化酶將乙醇氧化生成過氧化氫(H?O?),隨后用于形成具有強(qiáng)烈顏色和熒光的熒光素,檢測靈敏度可達(dá)0.05納摩爾。

 

艾美捷乙醇測定試劑盒

貨號:MA-0131

規(guī)格:100

樣本類型:血清、血漿、細(xì)胞裂解液、組織提取液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液

適用物種:通用(適用于所有物種)

檢測方法:比色法(檢測波長570納米)或熒光法(激發(fā)/發(fā)射波長=535/580納米)

檢測類型:定量

應(yīng)用:基于微孔板的比色法/熒光法檢測,用于測量多種樣本中的乙醇濃度。

靈敏度:0.05納摩爾

儲存條件:-20°C

運(yùn)輸條件:凝膠冷藏包

 

乙醇測定試劑盒檢測組分:

-檢測緩沖液:25毫升,貨號WMMA-0131A

-ADHP溶液:200微升,紅色,貨號MA-0131B

-乙醇氧化酶/過氧化物酶:凍干粉,綠色,貨號MA-0131C

-乙醇標(biāo)準(zhǔn)品(40mM):0.2毫升,黃色,貨號MA-0131D

 

乙醇測定試劑盒檢測原理:

1.乙醇被乙醇氧化酶氧化,生成乙醛和過氧化氫。

2.過氧化物酶利用過氧化氫將ADHP氧化為熒光素,產(chǎn)生顏色和熒光。

注意:空氣中的乙醇會對檢測性能產(chǎn)生不利影響。檢測必須在w全無乙醇的環(huán)境中進(jìn)行。

儲存和處理:在使用前將試劑盒儲存于-20°C。使用前將檢測組分恢復(fù)至室溫。打開試劑瓶前請短暫離心。

-檢測緩沖液:直接使用,儲存于4°C。不使用時(shí)請緊密封閉。

-ADHP溶液:直接使用,儲存于-20°C

-乙醇氧化酶/過氧化物酶:向酶混合物中加入220微升檢測緩沖液。儲存于4°C

-乙醇標(biāo)準(zhǔn)品:直接使用,儲存于-20°C。僅在取樣時(shí)打開,不使用時(shí)請緊密封閉。

 

檢測步驟:

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線:

-a.比色法檢測:將10微升乙醇標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)移至990微升檢測緩沖液中,混合均勻,配制成0.4mM的工作溶液。將0、510、1520、25微升的工作溶液分別轉(zhuǎn)移至96孔板的多個(gè)孔中,用檢測緩沖液將所有孔的體積調(diào)整至50微升,得到每孔0、2、46、8、10納摩爾的乙醇標(biāo)準(zhǔn)系列。

-b.熒光法檢測:按照比色法檢測稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,然后將10微升轉(zhuǎn)移至190微升檢測緩沖液中,配制成20微摩爾的工作溶液。將0、5、10、15、20、25微升的工作溶液分別轉(zhuǎn)移至96孔板的多個(gè)孔中,用檢測緩沖液將所有孔的體積調(diào)整至50微升,得到每孔0、100200、300、400、500皮摩爾的乙醇標(biāo)準(zhǔn)系列。

2.樣本準(zhǔn)備:所有樣本讀數(shù)必須在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi),并應(yīng)相應(yīng)準(zhǔn)備。液體樣本可以直接使用或用檢測緩沖液稀釋后測試。血清應(yīng)稀釋約10-100倍。將所有孔的體積調(diào)整至50微升。

-注意:純乙醇約為17M。酒精濃度為3%(約0.5M)至14%2.4M)的酒j飲料需要稀釋1000倍或更多。

3.啟動反應(yīng):每個(gè)反應(yīng)需要50微升反應(yīng)混合液。

4.測量:在570納米(比色法檢測)或激發(fā)波長535納米/發(fā)射波長580納米處監(jiān)測反應(yīng),室溫下持續(xù)60分鐘。

5.典型結(jié)果:

61.jpg

6.計(jì)算:

-從所有其他標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中減去零乙醇背景值(背景信號超過約0.1OD表明空氣中存在微量乙醇。背景讀數(shù)可能較大,必須從樣本讀數(shù)中減去??梢匀萑谈哌_(dá)0.5OD的背景)。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。確定標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率。將背景校正后的樣本值除以標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率,以獲得孔中的乙醇納摩爾數(shù)。將孔中的乙醇納摩爾數(shù)除以加入孔中的樣本體積(微升)=樣本中的乙醇納摩爾數(shù)/微升。如果樣本來自組織或細(xì)胞,將樣本中的乙醇納摩爾數(shù)/微升乘以樣本總體積,再除以用于制備樣本的組織毫克數(shù)或細(xì)胞數(shù)量=每毫克組織(或每細(xì)胞數(shù)量等)中的乙醇納摩爾數(shù)。


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