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初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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微管蛋白(純度>99%):豬腦,高純度、多用途

時(shí)間:2025/3/26閱讀:66
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微管蛋白(純度>99%):豬腦--微管蛋白是從豬腦中提取的,采用Shelanski等人的方法(1)進(jìn)行純化,并通過(guò)陽(yáng)離子交換色譜進(jìn)一步純化至>99%純度。微管蛋白以白色凍干粉的形式提供。

 

微管蛋白(純度>99%):豬腦w全具有聚合活性,采用z利技術(shù)凍干,以提高穩(wěn)定性和使用壽命。T2404°C干燥條件下可穩(wěn)定保存1年。

 

艾美捷微管蛋白(純度>99%):豬腦T240-A-T生物活性:

1單位微管蛋白定義為5.0 mg純化蛋白(通過(guò)Precision Red高級(jí)蛋白定量試劑貨號(hào)ADV02測(cè)定)。T240的生物活性通過(guò)微管蛋白聚合檢測(cè)進(jìn)行評(píng)估。通過(guò)觀察微管蛋白溶液在340 nm處的光密度增加,可以跟蹤微管蛋白聚合為微管的能力。在37°C下,使用0.8 cm光程(1/2面積96孔板中180 µL樣本體積)的分光光度計(jì),5 mg/ml微管蛋白溶液在通用微管蛋白緩沖液中加入5%甘油和1 mM GTP,應(yīng)在30分鐘內(nèi)達(dá)到0.75-1.10OD340 nm讀數(shù)。

 

需要注意的是,不含甘油的微管蛋白在G-PEM緩沖液中直到非常高濃度(>10 mg/ml)才會(huì)聚合,即使在這種濃度下,聚合速度也相對(duì)較慢。通過(guò)添加聚合促進(jìn)化合物(例如甘油、紫杉醇或DMSO),可以在低濃度下實(shí)現(xiàn)不含甘油的微管蛋白的高效聚合。

 

純度純度通過(guò)SDS-PAGE凝膠上蛋白質(zhì)的掃描分光光度法測(cè)定。樣品純度>99%。

21.png

120 µgT240蛋白在10% SDS-PAGE凝膠上進(jìn)行電泳分離,并用考馬斯亮藍(lán)染色。蛋白質(zhì)定量使用Precision Red蛋白定量試劑(貨號(hào)ADV02)進(jìn)行。

 

微管蛋白(純度>99%):豬腦用途包括

1抗微管蛋白配體的IC50EC50測(cè)定。

2微管結(jié)合研究。

3微管蛋白單體結(jié)合研究。

4組蛋白去乙?;?span style="font-family: Calibri;">6HDAC6)研究。

5微管激活的驅(qū)動(dòng)蛋白ATP酶檢測(cè)。

 

文獻(xiàn)參考:

Shelanski, M. L., et al. (1973). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 70, 765-768


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