細胞凋亡（apoptosis）是一種基本生物學現(xiàn)象，指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡，在多細胞生物去除不需要的或異常的細胞中起著必要的作用。在正?；罴毎校字＝z氨酸（PS）位于細胞膜的內(nèi)側(cè)，而在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面，暴露在細胞外環(huán)境中。膜聯(lián)蛋白V(Annexin V) 是一種分子量為35~36KDa的鈣離子依賴型磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力特異性結(jié)合。通過AbFluor^TM 488標記Annexin V即可簡單快速地直接檢測出細胞早期凋亡情況（綠色熒光）。

        碘化丙啶（propidine iodide，PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，而早期凋亡細胞的細胞膜是完好的，對PI有拒染性。但在凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI能透過細胞膜而使細胞核染上。

       使用AbFluo™ 488和碘化丙啶（PI）對細胞進行染色可以區(qū)分完整細胞，早期凋亡和晚期凋亡或壞死細胞。有關詳細信息，請參閱下面的列表。  

       * PI：Ex/Em = 535/617 nm (DNA)   Abbkine使用的AbFluor™ 染料，針對Annexin V研發(fā)了多種偶聯(lián)產(chǎn)物。AbFluor™染料與其它熒光標記染料相比，如FITC，TRITC，Cy^®染料，AlexaFluor^®和Dylight^®標記染料，具有相同或更好的標記性能和熒光表現(xiàn)（熒光亮度，耐光性），特別適用于體內(nèi)成像和流式細胞術。

       以Annexin V-AbFluor™ 488 細胞凋亡檢測試劑盒為例：  

使用喜樹堿（camptothecin）誘導Hela細胞凋亡（24h），使用Annexin V- AbFluor™ 488 細胞凋亡檢測試劑盒進行染色。圖中展示的是晚期凋亡/壞死細胞。（綠色為細胞膜，紅色為細胞核）
	使用喜樹堿（camptothecin）誘導Hela細胞凋亡（24h）。 使用Annexin V- AbFluor™ 488 細胞凋亡檢測試劑盒進行染色，可以區(qū)分早期凋亡細胞 (Annexin V- AbFluor™ 488 陽性), 晚期凋亡或壞死細胞 (Annexin V- AbFluor™ 488 與PI 均為陽性), 和活細胞 (未染色).

•        Annexin V細胞凋亡檢測試劑盒常見問題：

1.        1.Abbkine Annexin V細胞凋亡檢測試劑盒可以檢測人類以外動物的細胞凋亡嗎？

       答：當然。因為試劑盒原理是Annexin V與磷脂酰絲氨酸（PS）親和，而PS在不同物種之間沒有差異。  

2.        2.胰酶對貼壁細胞的影響？

       答：胰酶對細胞膜有一定的損傷，但用低濃度胰酶消化， 輕柔吹打貼壁細胞 2～ 3 次， 離心機 4℃， 300g， 5min 離心，處理得當?shù)脑挘?胰酶造成的損傷可以控制在 5%以內(nèi)， 有對照組的情況下對實驗結(jié)果不會造成明顯影響。  

3.        3.為什么只能用不含 EDTA 的胰酶消化貼壁細胞？

       答：Annexin V 是 Ca 依賴性蛋白， 所以不能加入 EDTA， 防止 EDTA 螯合了 Ca 離子從而影響 Annexin V， 進而影響結(jié)果。

       About Abbkine Scientific Co., Ltd.

       Abbkine Scientific Co., Ltd.成立于2012年。我們的使命通過為廣大科學家提供人類和動物健康研究所需的基礎研究工具，以期成為研究探索的關鍵推動者。我們將通過明確的核心戰(zhàn)略和促進誠信、開放、合作、創(chuàng)新和為客戶服務的企業(yè)文化，為廣大生命科學研究者提供買得起的高品質(zhì)產(chǎn)品，實現(xiàn)我們的使命。