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JHM南農(nóng)崔瑾:NMT發(fā)現(xiàn)富氫水可以提升Zn抑制植物實(shí)時(shí)Cd吸收的效果

閱讀:531        發(fā)布時(shí)間:2021-1-8

NMT作為生命科學(xué)底層核心技術(shù),是建立活體創(chuàng)新科研平臺(tái)的*技術(shù)。2005年~2020年,NMT已扎根中國(guó)15年。2020年,中國(guó)NMT銷(xiāo)往瑞士蘇黎世大學(xué),正式打開(kāi)歐洲市場(chǎng)。

 

 

基本信息

主題:NMT發(fā)現(xiàn)富氫水可以提升Zn抑制植物實(shí)時(shí)Cd吸收的效果

期刊:Journal of Hazardous Materials

影響因子:9.038

研究使用平臺(tái):NMT重金屬創(chuàng)新平臺(tái)

標(biāo)題:IRT1 and ZIP2 were involved in exogenous hydrogen-rich water-reduced cadmium accumulation in Brassica chinensis and Arabidopsis thaliana

作者:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)崔瑾、吳雪

 

檢測(cè)離子/分子指標(biāo)

Cd2+

 

檢測(cè)樣品

① 小白菜根伸長(zhǎng)區(qū)(距根尖600 μm根表上的點(diǎn))和成熟區(qū)(距根尖1600 μm根表上的點(diǎn))

② 擬南芥根伸長(zhǎng)區(qū)(距根尖200 μm根表上的點(diǎn))和成熟區(qū)(距根尖600 μm根表上的點(diǎn))

 

 

中文摘要(谷歌機(jī)翻)
 

通過(guò)Cd(鎘)濃度,Cd2+熒光染色,NMT(非損傷微測(cè)技術(shù))對(duì)Cd吸收進(jìn)行分析,結(jié)果表明,HRW(hydrogen-rich water,富氫水)在降低小白菜幼苗根部對(duì)Cd的吸收方面具有顯著的積極作用。BcIRT1(鐵調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1)和BcZIP2(鋅調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2)是小白菜中主要的Cd轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,但它們?cè)贖RW減少Cd吸收過(guò)程中的作用仍然未知。本研究驗(yàn)證了IRT1ZIP2在白菜和擬南芥中HRW減少Cd吸收中的功能。在擬南芥中的異源和同源表達(dá)表明,HRW顯著降低了野生型(Col-0)和轉(zhuǎn)基因擬南芥IRT1ZIP2中的Cd含量,但irt1zip2突變體除外。NMT檢測(cè)表明,HRW不僅降低了Cd2+在WT和轉(zhuǎn)基因株系根部的內(nèi)流,而且增強(qiáng)了Zn和Cd之間的競(jìng)爭(zhēng)。綜合來(lái)看,HRW誘導(dǎo)的植物Cd積累減少可能是通過(guò)抑制BcIRT1BcZIP2的表達(dá),影響BcIRT1BcZIP2對(duì)離子吸收的偏好性導(dǎo)致的。

 

 

離子/分子流實(shí)驗(yàn)處理方法

 

預(yù)處理

① 2日齡小白菜幼苗在0、50% HRW中處理1 d

② 15-17日齡擬南芥幼苗在0、50% HRW中處理1 d

實(shí)時(shí)處理

6.25 μM/L FeSO4 或7.5 μM/L ZnSO4實(shí)時(shí)處理10日齡擬南芥幼苗

 

 

離子/分子流實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

HRW預(yù)處理使小白菜根伸長(zhǎng)區(qū)和成熟區(qū)Cd2+流速分別降低了21.01%和31.97%(圖1)。

圖1. 50 μM Cd處理下HRW預(yù)處理對(duì)小白菜根部伸長(zhǎng)區(qū)(A, C, E)和成熟區(qū)(B, D, F)Cd2+流速的影響

 

研究發(fā)現(xiàn),除irt1-和zip2-突變體外,HRW預(yù)處理顯著降低了擬南芥根伸長(zhǎng)區(qū)Cd2+內(nèi)流(圖2)。HRW使WT和IRT1-和ZIP2-轉(zhuǎn)基因擬南芥(圖2G, H)的Cd2+平均內(nèi)流速率從30.34 %顯著降低到34.91 %。

圖2. 50 μM Cd處理下HRW預(yù)處理對(duì)轉(zhuǎn)基因擬南芥根伸長(zhǎng)區(qū)Cd2+流速的影響

 

為了闡明Cd與Fe或Zn的相互關(guān)系,使用NMT技術(shù)對(duì)實(shí)時(shí)Fe2+或Zn2+處理下擬南芥根(距根尖200 μm)Cd2+流速進(jìn)行了檢測(cè)。無(wú)論有無(wú)HRW預(yù)處理,F(xiàn)e2+的加入都急劇減少了Cd2+的內(nèi)流,這可能是由于它們?cè)诟滴针x子過(guò)程中的相互競(jìng)爭(zhēng)所致(圖3A)。在ZIP2型株系中,Zn2+顯著減少了Cd2+的內(nèi)流(圖3B)。此外,進(jìn)一步分析了由于添加鐵或鋅引起的Cd2+流速的降低率。結(jié)果表明,HRW預(yù)處理不會(huì)影響Cd2+和Fe2+之間的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系(圖3C)。但添加Zn2+時(shí),37 %的HRW預(yù)處理顯著降低了Cd2+流速(圖3D)。這表明HRW處理后,更多的Zn2+被轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白吸收,從而降低了對(duì)Cd2+的吸收。

圖3. 實(shí)時(shí)Fe2+或Zn2+處理對(duì)有無(wú)HRW預(yù)處理的擬南芥根系Cd2+流速的影響

 

 

其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 
  • HRW緩解了50 μM Cd脅迫對(duì)白菜生長(zhǎng)的抑制作用。

  • HRW抑制了白菜對(duì)Cd的吸收能力,終導(dǎo)致Cd積累量降低。

  • HRW抑制BcIRT1BcZIP2的轉(zhuǎn)錄水平。

  • HRW緩解了Cd對(duì)轉(zhuǎn)基因擬南芥的毒性。

  • HRW降低了轉(zhuǎn)基因擬南芥的Cd積累。

  • HRW降低轉(zhuǎn)基因植物鐵的濃度、提高鋅的濃度。

 

 

結(jié)論

 

本研究為闡明HRW降低白菜Cd積累的分子機(jī)制提供了新的見(jiàn)解。HRW能夠降低參與Cd吸收的BcIRT1BcZIP2的轉(zhuǎn)錄水平。此外,HRW還可影響Cd暴露下白菜和擬南芥中Fe和Zn的積累,改變Zn和Cd之間的競(jìng)爭(zhēng)力。雖然HRW直接通過(guò)何種途徑調(diào)控BcIRT1BcZIP2尚不清楚,但本研究證實(shí)了BcIRT1BcZIP2在HRW抑制Cd積累中的作用,這對(duì)闡明HRW在植物脅迫應(yīng)答中的生理功能具有指導(dǎo)意義。

 

 

測(cè)試液

 

50 μM CdCl2, 0.1 mM KCl, 0.3 mM MES, pH 6.0

 

關(guān)鍵詞:鎘;HRW;BcIRT1;BcZIP2;離子吸收

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