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基本信息

主題：NMT揭示以斑馬魚為材料的殼聚糖毒理機(jī)制

期刊：Carbohydrate Polymers

研究使用平臺(tái)：NMT毒理創(chuàng)新科研平臺(tái)

標(biāo)題：Characterizationand toxicology evaluation of low molecular weight chitosan on zebrafish

作者：臺(tái)北醫(yī)學(xué)大學(xué) Chia-Hsiung Cheng、Chih-Ming Chou

檢測(cè)指標(biāo)

Na⁺

檢測(cè)樣品

斑馬魚幼魚上皮細(xì)胞

離子流實(shí)驗(yàn)處理方法

斑馬魚幼體被浸泡在10μg/mL低分子殼聚糖（LMWCS）和10μg/mL LMWCS+ 10 mM Na₂HPO₄中5分鐘后檢測(cè)。

Na⁺流結(jié)果

采用非損傷微測(cè)技術(shù)對(duì)斑馬魚幼體上皮細(xì)胞釋放的Na⁺進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)。用10μg/mL的LMWCS孵育后，3只斑馬魚幼體的上皮細(xì)胞迅速釋放出Na⁺。用10 mM Na₂HPO₄中和可顯著逆轉(zhuǎn)Na⁺的流出?？偟膩碚f，這些數(shù)據(jù)表明LMWCS破壞了斑馬魚幼體的上皮細(xì)胞膜功能。

其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果

• LMWCS對(duì)斑馬魚幼魚具有一定的毒性，PBS和Na₂HPO₄緩沖液均能有效地中和這種毒性

• LMWCS導(dǎo)致斑馬魚幼魚的上皮細(xì)胞嚴(yán)重受損，終導(dǎo)致其死亡

• 在斑馬魚幼魚死亡前，可能引起卵黃上皮損傷和行為異常

• LMWCS對(duì)斑馬魚肝臟細(xì)胞膜損傷具有細(xì)胞毒性

• LMWCS破壞了成年斑馬魚的組織，鰓瓣損傷是成年斑馬魚死亡的主要原因

• LMWCS在河水中也可導(dǎo)致斑馬魚死亡

結(jié)論

LMWCS可迅速導(dǎo)致斑馬魚幼魚和成魚在水中死亡，即使在正常的河水中也是如此。LMWCS靶向并破壞上皮細(xì)胞膜和鰓瓣，誘導(dǎo)斑馬魚幼魚和成魚死亡。此外，LMWCS對(duì)斑馬魚肝細(xì)胞、斑馬魚幼魚和成魚的毒性可以用Na₂HPO₄緩沖液中和。即使在斑馬魚模型中也發(fā)現(xiàn)了LMWCS的毒性，但由于LMWCS的水不溶性和易被其它負(fù)離子中和，其毒性只存在于pH<7的環(huán)境中這些結(jié)果提供了對(duì)LMWCS特性的新理解。

離子流實(shí)驗(yàn)使用的測(cè)試液

0.5 NaCl,0.2 CaSO4,0.2 MgSO4,0.16 KH2PO4,0.16 K2HPO4，pH 7.0（單位mM）