旭月非損傷微測技術(shù)(NMT)與激光共聚焦技術(shù)
NMT和激光共聚焦技術(shù)的比較
什么是激光共聚焦
激光掃描共聚焦熒光顯微鏡(laser scanning confocal microscopy, LSCM)是一種利用計算機、激光和圖像處理技術(shù)獲得生物樣品三維數(shù)據(jù)、目前較為*的分子細胞生物學的分析儀器。
主要用于觀察活細胞結(jié)構(gòu)及特定分子、離子的生物學變化,定量分析,以及實時定量測定等。其不僅可以得到非常清晰的熒光圖像,進行多重熒光標記的定位和定量分析,還具有圖像三維重建、熒光共振能量轉(zhuǎn)移譜測定,甚至膜電位測定等功能,成為生命科學研究的重要技術(shù)手段。
激光共聚焦的局限
隨著激光共聚焦技術(shù)應用范圍的擴大,其在研究中的局限性也逐漸突顯。
激光共聚焦技術(shù)主要采集的是生物樣品內(nèi)部的離子分子信息,這些離子分子信息的改變既可能源于樣品內(nèi)部離子/分子源的變化,也可能源于樣品內(nèi)外的離子/分子交換。這兩種離子/分子變化過程是由*不同的生命機制引發(fā)的。
這要求研究者必須通過其它實驗結(jié)果,才能得出相對準確的結(jié)論。若單純用激光共聚焦數(shù)據(jù)作為檢測或診斷標準,往往面臨較大的假陽性風險。
NMT對比激光共聚焦
共同點
實時
動態(tài)
數(shù)據(jù)可視化
測定游離的離子
差異
激光共聚焦技術(shù) | 非損傷微測技術(shù) |
使用染料和激光光源 | 使用電極或者傳感器 |
需要標記 | 無需標記 |
熒光易發(fā)生淬滅 | 電極或者傳感器穩(wěn)定 |
測量時間短 | 測量時間可短,可長 |
半活體(有損傷) | 近似活體或者*活體(測定無損傷) |
檢測內(nèi)部的離子濃度變化 | 檢測跨膜的離子流速以及外部的離子濃度 |
測定種類較少,依賴于染料 | 測定種類多,可測Na+,K+,NO3-,O2等 |
測量材料不能太大,以細胞為主 | 測量材料不限,從細胞到整體都可以測量 |
只能同時測定一種離子 | 可以同時測定兩種離子 |
NMT可測樣品種類繁多
NMT可以同時測定兩種離子
結(jié)合
將激光共聚焦技術(shù)與非損傷微測技術(shù)(NMT)的結(jié)合,可以克服單純用激光共聚焦數(shù)據(jù)作為檢測或診斷標準面臨較大的假陽性風險,實現(xiàn)全面獲得被測樣品內(nèi)外的離子/分子流動信息。實現(xiàn)內(nèi)外兼測。