IOD1和Topoiomerase抑制劑（β-Lapachone）公司正在出售的產(chǎn)品：TSLP/FITC 熒光標(biāo)記淋巴生成-1抗體IgG
TSLPR/CRLF2/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠胸腺質(zhì)淋巴生成受體抗體IgG
TSP-1/THBS1/FITC 熒光標(biāo)記血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1抗體IgG
TTF-1/FITC 熒光標(biāo)記狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白抗體IgG

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

巨大芽胞桿菌Bacillus cereus大鼠白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)

沙氏乳桿菌Bacillus megaterium大鼠17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)

茹氏短芽孢桿菌Bacillus pumilus大鼠17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)

柔毛鏈霉菌Bacillus cereus大鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)

燼灰鏈霉菌Bacillus pumilus大鼠N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷(NAG)

糙孢籃狀菌Bacillus subtilis subsp. subtilis大鼠17-類固(17-KS)

居真菌細(xì)菌Bacillus licheniformis大鼠17-類固(17-KS)

肺炎克雷伯氏菌鼻硬結(jié)亞種Bacillus thuringiensis大鼠白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)

類馬鏈球菌Lysinibacillus sphaericus大鼠白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)

釀酒酵母Bacillus cereus大鼠白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)

大腸埃希菌Bacillus cereus大鼠白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)

NocardiopsisBacillus pumilus大鼠白介3(IL-3)

枯草芽孢桿菌Bacillus megaterium大鼠白介3(IL-3)

黃色鏈霉菌Bacillus cereus大鼠白介5(IL-5)

強(qiáng)酒海桿狀菌Bacillus cereus大鼠白介5(IL-5)

枯草芽胞桿菌Bacillus licheniformis大鼠苗條受體(LR/Ob-R)

細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體熱土厭氧棒菌Actinokineospora diospyrosa

G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體石油棲熱腔菌脫羧勒克氏菌

Rho相關(guān)蛋白激1抗體食基脫硫弧菌MG溶血性鏈球菌

維甲受體β抗體產(chǎn)纖維二糖梭菌（不提供）血液鏈球菌
IOD1和Topoiomerase抑制劑（β-Lapachone）產(chǎn)氨棒桿 化膽固

葡萄座腔 地膚子皂苷Ic

球孢白僵 膽固乙酸脂

威爾酵母 菊苣酸

鐮刀 麥芽糊精

貝酵母 3-異倒捻子

淡紫擬青霉 甲基-α-D-吡喃半乳糖苷

釀酒酵母 D-葡萄糖酸溶液

芽孢桿 β-倒捻子

氣生玫瑰單胞 甜蜜

類芽孢桿屬 α-倒捻子

黑曲霉 葡糖酸內(nèi)酯

黃曲霉 焦磷酸

草菇 焦磷酸鈉

白假絲酵母 DL-異檸檬酸三鈉鹽