JAK3抑制劑(JAK3-IN-1)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Selenoprotein W/FITC 熒光素標(biāo)記硒蛋白W抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2mg
間皮素抗體 Anti

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
沙福芽孢桿菌Corynebacterium sp.

戴爾福特菌Corynebacterium sp.

枯草芽孢桿菌Corynebacterium sp.

曼傘形霉Corynebacterium sp.

猴頭Corynebacterium sp.

突尼斯葉桿菌Corynebacterium sp.

大腸埃希菌Corynebacterium sp.

球孢鏈霉菌Corynebacterium sp.

玫煙色棒束孢Bacillus subtilis

大腸埃希氏菌Proteus sp.

大豆慢生根瘤菌Staphylococcus aureus

酒色青霉Escherichia sp.

假單胞菌Enterbacter aerogenes

島生異擔(dān)孔菌Bacillus sp.

纖維鏈霉菌Bacillus cereus

丁香假尾孢菌Bacillus subtilis

磷化Src原癌基因抗體耐鹽短桿菌肺炎克雷伯氏菌

磷化腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體硬結(jié)節(jié)桿菌表皮葡萄球菌

磷化上皮鈉通道β2抗體結(jié)冰假單胞菌委內(nèi)瑞鏈霉菌

指轉(zhuǎn)錄因子Slug+SNAIL抗體普茅斯沙雷氏菌藤黃微球菌
JAK3抑制劑(JAK3-IN-1)5HT3D + 5HT3E Receptor 英文名稱： 5-羥色胺受體3D+3E抗體 0.2ml

EFR3A 英文名稱： EFR3A蛋白抗體 0.2ml

Toll樣受體2抗體 Anti-TLR2 0.1ml

Anti-TNFAIP3 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-KCNC1(Ser503) 磷酸化離子通道蛋白Kv3.1抗體 規(guī)格 0.1ml

PDGF-R-B 血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg