商品介紹:
360A碘化物是G-四聯(lián)體結(jié)構(gòu)高親和性抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):737763-37-0 別名:360 A iodide 純度:98.0% 分子量:703.31 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:G-四聯(lián)體結(jié)構(gòu)抑制劑(360A iodide)
英文名稱:360A iodide
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
南海芽孢桿菌人組織蛋白DBacillus globigii小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)
小牛肝菌人激敏感性脂肪Bacillus gibsonii小鼠二氧化(DAO)
Isoptericola人胰激肽原Bacillus fusiformis小鼠二氧化(DAO)
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)人烏頭2Bacillus globigii小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)
雞傷寒沙門(mén)氏菌人26S蛋白體Bacillus globigii小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)
硬毛栓孔菌人周期依賴性激4Bacillus globigii小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)
Serratia marcescens subsp. sakuensis人胎盤(pán)堿性磷Virgibacillus halodenitrificans小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)
釀酒酵母人受體酪激Bacillus halmapalus小鼠活化蛋白C(APC)
斡氏假單胞菌人絲裂原激活的蛋白激/MAP激Alkalibacillus haloalkaliphilus小鼠活化蛋白C(APC)
子午線假單胞菌人溶菌Bacillus horikoshii小鼠α葡萄糖苷(a-Glu)
高雄山蟲(chóng)草人黏著斑激Bacillus insolitus小鼠α葡萄糖苷(a-Glu)
枯草芽孢桿菌人可溶性磷脂A2Bacillus halodurans小鼠(trypsin)
ATCC 49479人脫氧核糖核ⅠBacillus jeotgali小鼠(trypsin)
綠色木霉人精Bacillus horti小鼠破骨分化因子(ODF)
Ag10(蘑菇)堿性磷Bacillus cereus小鼠破骨分化因子(ODF)
甘瓜發(fā)光桿菌人間變性淋巴瘤激Bacillus licheniformis小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)
透明帶黏附蛋白ZAN抗體松針層孔菌人視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞
鋅結(jié)合乙脫氫結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體假蜜環(huán)菌(亮菌)大鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞
鋅指蛋白481抗體黑管孔菌大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
鋅指蛋白ZBTB34抗體小馬勃5-1豬肺泡巨噬細(xì)胞
G-四聯(lián)體結(jié)構(gòu)抑制劑(360A iodide)裂擬迷孔 當(dāng)藥寧
宿毛原小單孢 丹參新酮
殼 東莨菪堿
多布克魯維酵母 當(dāng)歸酰異五味子O
德里腐霉 獨(dú)活
鏈霉 大果桉B
釀酒酵母 DL-丁香樹(shù)脂
釀酒酵母 大黃甲-8-O-β-D-葡萄糖苷
白僵 酰
單色革蓋 丁香
肝色牛排 對(duì)羥基肉桂酸
枯草芽孢桿深黑變種 膽維他
黑曲霉 達(dá)巴
帚石南棒桿 對(duì)甲氧基苯甲
芽孢桿 橙皮油內(nèi)酯