產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EZH2抑制劑(EPZ011989)
英文名稱:EPZ011989
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
EPZ011989是EZH2高效選擇性且抑制劑,對(duì)wt EZH2以及EZH2突變型Ki值<3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1598383-40-4 純度:98.93% 分子量:605.81 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
沙棘生盾殼霉Haloferax gibbonsii大鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)
腸桿菌屬Haloferax denitrificans大鼠淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)
土曲霉Haloferax volcanii大鼠淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)
串珠鐮刀菌*(都不提供)Haloferax volcanii大鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)
釀酒酵母Halococcus morrhuae大鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)
小孢矛束霉Haloferax mediterranei大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)
中國(guó)腐質(zhì)霉Micrococcus luteus大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)
諾爾氏菌Clostridium sporogenes大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)
枯草芽孢桿菌Lactobacillus plantarum大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)
枯草芽孢桿菌Lactobacillus plantarum大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)
蠟樣芽孢桿菌Rhodobacter sphaeroides大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)
解酯假絲酵母解酯變種Rhodopseudomonas faecalis大鼠透明質(zhì)(HA)
馬昆德擬青霉Blastochloris viridis大鼠透明質(zhì)(HA)
大腸埃希氏菌Rhodobacter blasticus大鼠胰高血糖樣肽1(Glp-1)
灰黃鏈霉菌Rhodobacter blasticus大鼠胰高血糖樣肽1(Glp-1)
灰樹(shù)花Rhodopseudomonas palustris大鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)
磷鞘裂解1抗體垂頭蟲(chóng)草禽呼腸孤病毒
轉(zhuǎn)錄因子SP3抗體樹(shù)舌靈芝馬爾他布魯氏菌 生物Ⅲ型
轉(zhuǎn)錄因子SP6抗體硫磺菌溶組織梭菌
13號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體網(wǎng)紋馬勃產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒D型
EZH2抑制劑(EPZ011989)黒曲霉 漢黃芩
變位艾耳球蟲(chóng) 雞蛋清白蛋白
黑曲霉 雞蛋清白蛋白
茄勞爾氏 膠原蛋白
無(wú)花果炭疽盤孢 膠原蛋白
乳脂馬杜放線 膠原蛋白
球紅酵母 膠原蛋白
橙色小月 膠原蛋白
總狀共頭霉 蛋白A
大腸桿 干酪
球孢白僵 干酪
綠針假單胞綠針亞種 肝鋰
解淀粉芽孢桿 肝鈉
多主葡萄座腔 干酪鈉
栗疫病 干酪
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)